实验方法原理
实验材料 保存于细菌中的克隆纯的、已测序确证的人 EST 序列
试剂、试剂盒 LB 培养基超级肉汤培养基乙醇裂解液RNA 酶溶液缓冲液乙醇 乙酸溶液丁二酸酐1-甲基-2-吡咯烷酮硼酸钠
仪器、耗材 离心机96 孔热循环仪水浴锅微量滴定板清洗仪
实验步骤
实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」
1. 将密闭的克隆纯的、已测序确证的人 EST 母板在 37℃ 培养过夜。
2. 取多套标准圆底 96 孔板,全部做好标记,每孔加入 100 ul 添加了 100 ug/ul 羧苄青霉素的 LB 培养基准备复制。
为保存母板,第一次复制母板时应该多重复几套平板作为工作平板。应该核对这些 EST 克隆是装在青霉素抗性的载体里,一般入 IMAGE 克隆都是这样的。