lcms分析方法建立的步骤

进行质谱参数优化

(1) 配制相应化合物标准品溶液(尽可能使用单标,如无单标则需保证没有产生相同母离子子离子对的化合物存在): 配制浓度: 1ppm左右(浓度过大或过小均会影响优化结果)

(2) 使用流动注射方式进行优化: 不连接色谱柱, 使用两通连接管路.

液相条件:

流动相 甲醇或乙腈: 水=1:1 (根据实际情况选择合适的流动相及比例)

流速: 0.15ml/min

液相停止时间：1min

(3) 开始MRM优化过程

点击实时分析窗口-Method标签，选择Optimization for Method 选项

选择 Search product ion and optimize MRM

在下表中编辑优化内容：选择Check for Precursor，Adjust Precursor以及Optimize Voltage三项；输入化合物名称，母离子质荷比(Precursor m/z), 选择相应+/-模式，输入起止时间（与LC停止时间一致：1min）；选择输出文件夹位置(Output); 开始执行优化(Start)

(4) 得到质谱参数优化结果： 选择相应的定性离子以及定量离子，保存方法

3 连接色谱柱，优化液相方法，确认液相分离方法，保存该方法。

4 确认各个化合物保留时间

打开Postrun窗口

在Postrun窗口打开经液相分离的数据

将化合物表切换至Edit模式，选择Ret.Time标签

鼠标点击相应目标化合物谱峰，自动添加保留时间

切换至View模式，保存方法。

5 优化分组

打开实时分析窗口，调用确认保留时间后的方法。

选择实时分析窗口-方法标签-Update MRM event time by compound table, 则MRM运行时 间自动根据化合物表中的保留时间自动进行调整

结果如下所示：

如需对监测时间进行修改，则选择Method菜单的Data Processing Parameters[MS]标签

选择Identification 标签，对Process Time 进行修改，如下图所示

再进行更新(Method标签-Update MRM event time by compound table),则相应监测时间发生变化，如下图所示(根据样品实际情况，选择合适的监测时间窗口)

备注：如需添加其它MRM方法，选择Method-Add MRM event

添加相应方法即可

6建立方法，进行相关其它试验。

编辑批处理表，采集样品数据。

7 在Broswer窗口中制作工作曲线。

打开Broswer窗口

将数据添加至该窗口中：

设置合理积分参数，使目标谱峰被积分、识别。

将Method View窗口切换至Edit状态，切换至Integration标签，选择合理积分参数

选择 Peak Integration for All data

在Chromatogram view察看结果

在Method-View-Compund table添加已知标准品浓度，切换至View

在Quantative Results View中选择相应的Sample Type和Level#