发布时间:2018-04-02 17:15 原文链接: 毛细管区带电泳

样品在电解液中泳动,根据物质的荷/质比差异来进行分离,比值愈大,跑得愈快。 

毛细管带电泳毛细管带电泳


毛细管区带电泳的进样方式有三种,分别为压力进样、电动进样、浓缩进样,如下图: 

方式方式

 

常用毛细管规格如图示,毛细管分非涂层毛细管(裸管)和内壁涂层毛细管(涂层管)两类。 

分类分类

非涂层毛细管-电渗流的概念(电渗流是CE中最大的驱动力来源之一):
电渗流是毛细管内壁表面电荷所引起的管内液体的整体流动,来源于外加电场对管壁溶液双电层的作用。
电渗流的特点: 

特点特点



纯电泳状态: 

状态状态



电渗流+电泳: 

电渗流电渗流

 
电渗流的正面作用:
1.增加分离速度;
2.使得正、负电荷物质同时分离。

电渗流的负面作用:
1.减少分离时间和分离有效距离;
2.电渗流的波动极大的影响了迁移时间的重复性。

影响电渗流的因素:
1.PH值: PH值越高,电渗流越大。 

ph值ph值

 

2.离子强度:离子强度越高,电渗流越小。
3.缓冲溶液添加剂:离子型表面活性剂、有机溶剂、环糊精 

控制电渗流的三个重要手段:
1.采用涂层毛细管,消除电渗流的影响;
2.改变pH,从而调整电渗流的大小。pH<3时电渗流很低;当pH>10以后,电渗流基本不增加;
3.添加剂:有机溶剂可以降低电渗流的大小,从而增加分离的有效距离;表面活性剂可以彻底改变电渗流的方向和大小,主要是在阴离子分析时使用。

CZE中缓冲溶液的影响和选择:
1.在所选的pH范围内有较强缓冲能力;
2.在检测波长处有低的紫外吸收;
3.小的淌度(即大体积、低电荷离子)以降低所产生的电流。
那些被称为生物“优良缓冲液”的,如Tris, borate, CAPS等特别有用,因为这些缓冲溶液中的离子一般较大,能够在较高浓度下使用而不会产生大的电流,但一个潜在的缺点是这些大的缓冲离子有强的紫外吸收。

常用的CE缓冲体系:
1.磷酸钠体系:宽缓冲范围
2.硼酸钠体系:高pH范围
3.Tris-HCl体系:低pH范围
4.醋酸-醋酸铵体系:CE/MS常用体系


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