树突细胞是免疫系统在抗原的识别与摄取,原始T细胞的模仿或填充方面的防线。填充T细胞时,树突细胞过敏原内化作用和内吞作用的减弱是十分重要的。
此文章发表于2015年6月的PNAS杂志上。
在该文章中主要研究纯化重组非糖基化花粉过敏原phl p5和向日葵,SF-nsLTP到MoDCs中提取的正常的脂质转移蛋白的捆绑和内化作用。利用免疫荧光染色检测phlp 5的CD23和FceRI的共存性。EE和LE中过敏物质定位利用EEA1和LAMP1的联合染色确定。
实验设置方面,phl p5和SF-nsLTP与花粉过敏与非花粉过敏的个体中得到的MoDCs相结合。竞争性过敏源吸收实验证明,phl p5,SF-nsLTP吸收的顺序是非优先和同时的。没有检测到phl p5,CD23和FceRI的重叠信号。对于该两者过敏原而言都位于早期和后期内涵体。
当前实验应用的试验方法测定体外模型中过敏原的吸收。竞争性实验与独立实验中过敏原吸收是否量化可得出。
实验部分应用奥地利TissueGnsotics公司的TissueFAXS扫描产品及TissueQuest分析软件。
扫描部分:marker的结合和吸收,单个细胞中蛋白质的共存利用TG公司配备63倍油镜的200荧光显微镜系统。TissueFAXS扫描软件则用来观察细胞形态的结构。
分析部分:
如图中显示FceRI和CD23的表达,MoDCs中的lgE。4℃时的Phl p5伴随MoDCS。MoDCS来自过敏性和非过敏性供体的单核细胞。Phl p5被固定在MoDCS中。
总之,花粉过敏,非花粉过敏的个体吸入的与食物过敏原MoDCs进行同步吸收的结果可通过免疫荧光显微镜观察。phl p5,SF-nsLTP二者的吸收机理在是否花粉过敏的个体中对比不明显。体外细胞模型中受体的吸收是独立的。当前实验数据显示,MoDCS过敏原的吸收与供体的过敏状态是独立的。对于过敏原吸收的分子层面的研究有助于从抗原到T细胞的通路识别。该文章为过敏性疾病中反向调节Th2反应提供数据参考。
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