为了正确理解比耳定律，为了用好各类光吸收的分析仪器，使用者应从仪器学的角度，了解导致比耳定律偏离（即比耳定律产生误差）的主要因素。下面将简单讨论这些因素。
1．非单色光引起的偏离
从理论上讲，比耳定律只适用于单色光，但在实际工作中并非如此，根据仪器学理论，绝对不可能从光学分析仪器上得到真正的单色光，只能得到波长范围很窄的光谱带。因此，进入被测试样的光仍为在一定波段内的复合光。由于物质对不同波长的光具有不同的吸光程度，故在实际工作中即使用高档的分光光度计，采用很窄的狭缝宽度（用波段很窄的复合光照射样品），仍然会产生比耳定律的偏离。
2．杂散光引起的偏离
杂散光是紫外可见分光光度计、原子吸收分光光度计等光吸收类光谱仪器的主要分析误差来源。杂散光产生的原因很多，最主要的是光栅、外光路和单色器内壁散射等原因产生杂散光，它使分析测试的吸光度变小，特别在高浓度时，杂散光会引起分析测试的数据变小，引起比耳定律的偏离。一台紫外可见分光光度计仪器的杂散光80%来自光栅，同时，因为物质是由许多粒子组成，这些粒子会对入射光产生散射。并且随着粒子浓度的增大，这些散射光的强度会增强，透射光强度会降低，使被测试样的吸光度增大，从而引起比耳定律的偏离。另外，样品等因素也是误差的一个来源，由于不少物质在光的照射下会产生光化学反应、光致发光现象或荧光，这也将导致比耳定律的严重偏离。
3．噪声引起的偏离
噪声对于光学类分析仪器非常重要。噪声会直接影响光谱分析仪器的信噪比，降低仪器的灵敏度。噪声限制紫外可见分光光度计、原子吸收分光光度计仪器对样品分析浓度的下限（检测限）。噪声主要来自仪器的电子学系统。一台紫外可见分光光度计或原子吸收分光光度计的噪声大，都会使低浓度样品分析测试的吸光度值增大，从而偏离比耳定律。
4．光谱带宽引起的偏离
光谱带宽会直接引起比耳定律的偏离，这是国内外许多科技工作者不注意但又特别重要的问题。在紫外分光光度计中，不同的样品，要求用不同的光谱带宽来分析。不同的光谱带宽，有不同的分析误差。所以，在紫外光谱分析工作中，有一个选择最佳光谱带宽的问题。对于原子吸收光谱仪器，同样有一个最佳光谱带宽的选择问题。这些都是光谱仪器的设计、制造、使用者们必须认真考虑的问题。
5．化学因素引起的偏离
在化学分析中绝大多数是基于被测定成分与试剂之间的反应，从而得到一定的反应产物。这个产物不一定是稳定的，有时还会继续产生化学反应、溶剂效应，有时试剂中还有杂质等的干扰，这些都会引起比耳定律的偏离。
6．其他因素引起的偏离
除上述因素外，分析测试时的温度也可引起比耳定律的偏离，一般低温法可提高分析灵敏度就是这个原因。还有压力、光学传感器的非线性等，都是引起比耳定律偏离的原因。