气质联用测定酒中邻苯二甲酸酯类残余物方法的改进

气质联用测定酒中邻苯二甲酸酯类残余物方法的改进

　　0 引言 
　　邻苯二甲酸酯类是一种有毒的高沸点难挥发液体，它一般作为材料添加剂以增加塑料的柔软性。酒产品中的塑化剂正是源于塑料材料的特定迁移和溶出。如塑料接酒桶、塑料输酒管、酒泵进出乳胶管、封酒缸塑料布、成品酒塑料内盖、成品酒塑料桶包装等。其实酒中添加塑化剂能让年份不够的酒看起来有醇度，增加各种增粘剂可固化伪造粮食酒内的糖分，还能产生粘杯挂杯的效果。目前国家已经颁布的检测食品中邻苯二甲酸酯类的国家标准GB/T 21928-2008《食品塑料包装材料中邻苯二甲酸酯的测定》[2]和GB/T 21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》[3]，但该标准对酒中邻苯二甲酸酯提取所测定的结果不稳定，回收率低。本文采用GC/MS联用技术建立了测定酒中最常检出的三种邻苯二苯酸酯类中的邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸（2-乙基）己酯的方法，测定的结果稳定，回收率高，能满足检测酒中邻苯二甲酸酯的测定要求。 
　　1 实验部分 
　　1.1 主要仪器与试剂 
　　①安捷伦7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪、EI源、1701A色谱工作站；②邻苯二甲酸标准物质（国家标准物研究中心，三种标准物质的标值：DIBP：99.0%，DBP：99.0%，DEHP：99.0%。）；③氯化钠：分析纯，600℃烘4小时，冷却后干燥器中保存；④正己烷：农残级；⑤丙酮：农残级。 
　　1.2 气相色谱-质谱条件 
　　①色谱柱：PH-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.25mm），载气：氦气（纯度大于等于99.999%），流速1ml/min；②进样口温度：260℃；③升温程序：初始温度90℃，保持1min，以25℃/min升温300℃保持3min；④进样方式：不分流进样；⑤进样量：1ml；⑥辅助加热温度：290℃；⑦电离方式：电子轰击源（EI）；⑧电离能量：70ev；⑨溶剂延迟：3.5min；⑩监测方式：SIM模式。 
　　1.3 DIBP、DBP、DEHP标准曲线的建立 
　　将含有DIBP、DBP和DEHP的混合标准溶液用正己烷稀释配制0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0PPM浓度的标准溶液，经GC-MS仪器，以SIM模式扫描进行分析测定，以浓度为横坐标，特征碎片离子的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。 
　　1.4 试样处理 
　　称取酒样品5g于10ml带塞玻璃管中，置于80℃的水中水浴40min，取出冷却至室温，加入5ml正已烷，添加氯化钠至饱和，再旋涡振荡2min，以4000r/min的转速离心5min，吸取上层清液置于另一离心管中，再加入2ml正已烷于原样品中，重复二次上述步骤吸取出上层清液，将三次所吸取出的上层清液合并，将合并的提取液置40℃水浴氮吹浓缩为2ml，上机分析。 
　　2 结果分析与讨论 
　　2.1 玻璃仪器对分析结果的影响 由于邻苯二甲酸酯类易迁移和溶出对浓度影响很大，因此提取酒中塑化剂一定要避免接触塑料类容器，以及洗涤干净所用的玻璃器皿。本实验所用玻璃器皿清洗干净后，用蒸水淋洗三次，再用丙酮浸泡1h，最后在200℃下烘烤2h，冷却至室温备用避免污染。 
　　2.2 质谱色谱条件的确定 不同浓度的混合标样首先使用全扫描方式（质量范围50-450u）进行测试。从质谱图的碎片分析邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP）碎片离子149为基峰，223、205、167为特征离子峰。邻苯二甲酸二丁酯（DBP）碎片离子149为基峰223、205、121为特征离子峰，邻苯二甲酸（2-乙）基己酯（DEHP）碎片离子149为基峰167、279、113为特征离子峰。 
　　2.3 样品提取方式的影响 由于酒中有大量水和乙醇，而邻苯二甲酸酯类化合物在乙醇又易溶，因此用正己烷溶剂萃取白酒中邻苯二甲酸酯类效果欠佳，为了能有效完全萃取邻苯二甲酸酯类，本方法采用水浴加热挥发乙醇正己烷萃取提取法，经加标回收试验发现80℃水浴是最佳提取温度。 
　　2.4 线性关系与检出限 按照结果表明，在0.50～5.00 mg/L范围内所测的3种邻苯二甲酸酯类物质显良好线性关系。 
　　DIBP、DBP和DEHP的混合标液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 PPM六种浓度的总离子图叠加图，如图1所示。 
　　2.5 加标回收率及方法准确度 按照上述实验方法处理样品，对市售的白酒进行测定，对 DIBP、DBP、DEHP各组分进行加标回收实验，分别添加2个浓度水平的混合标样。结果表明，平均回收率为95.7%-98.3%。 
　　3 结论 
　　本实验方法使用的匀为玻璃器皿，所用的玻璃器皿均经丙酮浸泡后烘烤，防止使用的玻璃器皿带来污染。进标样前先做空白试验， 谱图采用离子描方式得到，不存在杂质峰干扰。所用的仪器要求清洁度较高，稳定性较好。配制标准物质时注意要充分摇均匀，才能获得良好线性关系的标准曲线。 
　　本方法与国标相比：①增加了80℃的水浴40min挥发乙醇。邻苯二甲酸酯类物质的沸点高，稳定性好，80℃的水浴不会挥发邻苯二甲酸酯类物质。由于乙醇对邻苯二甲酸酯类化合物的溶解性很好，因此在使用正己烷溶剂萃取白酒中的邻苯二甲酸酯类化合物时，效果较差。先除去酒中乙醇后再用正己烷提取分析测定可避免乙醇带来的误差。②加入氯化钠至饱和，可以使有机相与无机相分层效果更好。氯化钠使用前600℃烘4小时，把氯化钠试剂可能带来的邻苯二甲酸酯类挥发，消除对测试的干扰。③离心，使分层时间更短效果更好。有些配制酒加入正己烷旋涡振荡后产生许多气泡，静置很长时间都不能分层。用离心机以4000r/min的转速离心5min即可分层取出上清液。④正己烷提取增加到三次，再合并提取液浓缩。如果加2ML正己烷萃取一次，测定结果经常出现重复性差，经过三次提取更充分。