原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法

1 范围

本标准规定了液相色谱法快速检测原料乳中三聚氰胺的方法。

本标准适用于原料乳，也适用于不含添加物的液态乳制品。

本标准定量检测范围为0.30mg/kg～100.0mg/kg，方法检测限为0.05mg/kg。

注：当原料乳中三聚氰胺的含量大于100.0mg/kg时，具体操作方法见6.2.2.3.2。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的zui新版本。凡是不注日期的引用文件，其zui新版本适用于本标准

GB/T6379.1 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第1部分：总则与定义

GB/T6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第2部分：确定标准测量方法重复性与

再现性的基本方法

GB/T6682 分析实验室用水规格和实验方法

3 原理

用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂，强阳离子交换色谱柱分离，高效液相色谱

-紫外检测器/二极管阵列检测器检测，外标法定量。

4 试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。

4.2 磷酸（H3PO4）。

4.3 磷酸二氢钾（KH2PO4）。

4.4 三聚氰胺标准物质（C3H6N6）：纯度大于或等于99%。

3

4.5 三聚氰胺标准贮备溶液：1.00×10 mg/L。

称取100mg 三聚氰胺标准物质（准确至0.1mg），用水完全溶解后，100 mL 容量瓶中定容至刻度 ，

混匀，4℃条件下避光保存，有效期为1个月。

4.6 标准工作溶液：使用时配制。

2

4.6.1 标准溶液A：2.00×10 mg/L。

准确移取20.0 mL 三聚氰胺标准贮备溶液（4.5），置于100mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀 。

4.6.2 标准溶液B：0.50mg/L。

准确移取0.25mL 标准溶液A（4.6.1），置于100mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

4.6.3 按表1 分别移取不同体积的标准溶液A（4.6.1）于容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。按表2

分别移取不同体积的标准溶液B（4.6.2）于容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

4.7 磷酸盐缓冲液：0.05 mol/L。

称取6.8g磷酸二氢钾（4.3）（准确至0.01g），加水800mL完全溶解后，用磷酸（4.2）调节pH至3.0，

用水稀释至1L，用滤膜（4.9）过滤后备用。

4.8 一次性注射器：2 mL。

4.9 滤膜：水相，0.45μm。

4.10 针式过滤器：有机相，0.45μm。

4.11 具塞刻度试管：50mL。

5 仪器

5.1 液相色谱仪：配有紫外检测器/二极管阵列检测器。

5.2 分析天平：感量0.0001g和0.01g。

5.3 pH计：测量精度±0.02。

5.4 溶剂过滤器。

6 测定步骤

6.1 试样的制备

称取混合均匀的15 g原料乳样品（准确至0.01g），置于50mL具塞刻度试管（4.11）中，加入30mL

乙腈（4.1），剧烈振荡6 min，加水定容至满刻度，充分混匀后静置3 min，用一次性注射器（4.8）吸

取上清液用针式过滤器（4.10）过滤后，作为高效液相色谱分析用试样。

6.2 高效液相色谱测定

6.2.1 色谱条件

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