动物组织
碳酸铵缓冲液PMSF
离心机
1将从结肠上刮下来的黏膜放人5倍体积的碳酸盐缓冲液(pH9.2,含抑胃肽酶和PMSF)中,使用Ultra-Turrex匀浆器匀浆。
②10000g离心20min,除去组织碎片。
③逐滴加入lmol/LHCl(约需100ml),缓慢(大于2h)调上清液的PH值至4.5,并不断搅动。使黏蛋白形成絮状沉淀。
④4℃:条件下10000g离心20min,以除去沉淀。上清液为粗提液,可以作为纯化方案的原始材料。