结合磁珠实验

磁珠

Dynabead M-280链霉抗生物素

磁设备

实验方案 A

1. 振荡 lmin 以使 Dynabead M-280 链霉抗生物素重新成为混悬液。

2. 将 2X 的 100 ul Dynabeads 转移至 U—个 1.5 ml 的 Eppendorf 试管中。

3. 用磁设备固定磁珠，移去上清液。

4. 用 200 ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液重悬磁珠冲洗 3 次，固定磁珠，移去冲洗液。

5. 将 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成两份各 10ul，每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 结合及冲洗缓冲液；混合后加入一份冲洗过的磁珠。

6. 混合后，在室温下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。

7. 用磁设备固定磁珠，弃去上清液。

8. 用 200ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液冲洗固定的磁珠 3 次，然后再用 200ul 的 LoTE 冲洗 1 次。

9. 在冲洗完最后 1 次后，固定磁珠并移去 LoTE。

10. 继续进行第 5 步