特异性阻断法
mTOR抑制剂作用法
样本比较法
实验方法原理 |
通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变,探讨相关的分子机制。 |
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实验材料 | HepG2人肝癌细胞 Hep3B人肝癌细胞株 人正常肝细胞株QSG-7701 |
试剂、试剂盒 | LY294002 Rapamycin 阿霉素 |
仪器、耗材 | 流式细胞仪 荧光显微镜 二氧化碳细胞培养箱 酶标仪 培养板 盖玻片 载玻片 |
实验步骤 |
一、细胞株表达情况监测
二、细胞株表达结果
三、结果分析
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其他 |
一、PI3K简介
Akt是一种Ser/Thr蛋白激酶。在磷脂酰肌醇依赖的蛋白激酶(phosphoinositide-dependent protein
kinase,PDK)的协同作用下,PI-3,4P2 和 PI-3,4,5P3 可与Akt结合,导致Akt从胞浆转位到质膜,并促进 Akt 的
Ser473 和 Thr308 位点磷酸化。
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