实验方法原理 | 打开显微镜,校准光路。在标本有关区域聚焦。检査相机与电脑的连接,将光导向相机,聚焦,保存图像。 |
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实验材料 | 待检査培养物 |
仪器、耗材 | 倒置显微镜 镜头纸 图像记录纸 测微尺 |
实验步骤 | 1. 准备照相用的培养物(确保培养物没有碎片一如在照相前更换原代培养液) (a)培养瓶培养 i)将培养瓶拿到超净台中,松开瓶盖,冷却培养物。 ii)当培养物温度为室温时,盖紧瓶盖。可避免冷却引起的变形。 iii)转动培养液冲洗培养瓶顶部的内面,移除可能形成的冷凝物。 iv)直立培养瓶,使培养液流下。 (b)培养皿或培养板培养物 i)在超净台中,冷却培养物。 ii)更换培养皿或培养板的盖子(确保样品标记在培养皿或培养板的底部)。 2. 选择视野和放大倍数(4× 最适于克隆或单层细胞排列方式;10× 适于典型图片;20× 适于细胞细节的图片),避开培养瓶上的瑕疵或标记(总在培养瓶或培养皿的侧面作标记,而不是顶部或底部)。(倒置显微镜配备以下附件:10×、20× 或40× 相差物镜;带适于10× 、20× 或40× 物镜的相差环的聚光器;三筒机头或其他适于CCD 相机的接口;中性密度滤光片,2× 和4×。) 3. 检査焦距 (a)利用取景框或物镜中的标线,调节双同目镜的焦距,适合自己的眼睛; (b)聚焦显微镜。 4. 打开显示器,检査屏幕上图像的密度和对比度,黑白照相利用变阻器调节显微镜光线强度,彩色照相利用中性密度滤光片调整(如果色温不正确,照片可在后期电子加工处理)。 5. 如果需要,再聚焦显微镜。 6. 用适宜于最终用途及存储设备允许的分辨率存储照片(如 940 × 740 需要 2 Mb 存储空间,如果洗印 5 × 7 英寸即 12 cm × 18 cm 图片时,质量合适)。 7. 调低电源亮度,防止培养物过热。(可用红外滤光片将过热程度降到最低。) 8. 在同样放大倍数下,用测微尺重复步骤 3~6 , 得出放大倍率。如果图像采用相同的方式处理,则可用作标尺。 9. 将培养物重新放回培养箱。 10. 根据保存的文件名,完成图片拍摄内容的记录,否则图像难以辨认。 11. 图像可使用 Adobe PhotoShop 程序存储、观看、编辑或进行格式化处理, 也可使用高质量喷墨或彩色激光打印机和柯达 ColorEase 打印图片。 |
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