①外观形态:菌液澄清、棕黄色液体、菌丝呈放射状, “菌球”味感有水果香味、稍酸、菌球量占30%以上。
②镜检形态:美蓝单染色后观察,菌丝着色深、均匀、粗壮、分枝呈树枝状。侧丝线形、顶端稍弯曲、生长点多见,可见大量椭圆形分生孢子,无杂菌污染,无明显空泡,有锁状联合。
(3)液体摇瓶生产技术规程:
①工艺流程:母种 一级摇瓶种子 二级摇瓶发酵。
②培养基配方:蛋白胨1.5%、酵母膏0.1%、麦芽糖1%、葡萄糖2%、杨树木屑5%、硫酸镁0.075%、磷酸二氢钾0.15%、维生素B10. 01%、pH值6.5(消前)。
③制法:按配方规定量准确称取各药品,加一定量水加热溶解,定容至规定量,杨树木屑加水浸煮,温火下30~40min,用八层纱布过滤取滤汁,充分拌匀后分装于三角瓶中(500ml三角瓶装量至200ml)塞上棉塞(棉塞包扎纱布)上覆牛皮纸,置高压蒸汽灭菌锅灭菌(1kg/㎝2)30min,取出检验无杂菌污染备用。
④接种:在无菌条件下,按斜面与摇瓶之比为1:5(斜面比摇瓶)的比例接种。一般一只斜面母种可接500 ml三角瓶2~3瓶。取一支带长把的铁环,环上缠绕纱布后,吸足95%酒精,点燃后套在大三角瓶瓶口上,形成一道“火圈”,阻止杂菌侵入,将斜面母种挖块后,经“火圈”中心接入瓶内,每瓶不少于3块(0.6×0.5㎝/块)。
⑤培养:要求培养温度22℃±2℃,旋转式摇床的转速为170~200转/min,光线以黑暗为佳。
⑥培养终止时间为7d。
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