发布时间:2020-03-01 21:03 原文链接: 超滤离心管

超滤离心管 

超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;

两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;

截留分子量广泛,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;

最新推出ZL产品Hydrosart膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。

使用注意事项

(1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

(2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。

(3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。

(4)当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。

(5)前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再 浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。 [1] 

Nanosep& Nanosep MF超滤离心管

仅需5到15分钟,即可对50到500μL样本进行简便、可靠的浓缩与脱盐处理

— 快速处理样本。

— 通常,回收率高于90%;备有低蛋白质结合的Omega™、Bio-Inert®或GHP滤膜可供选择。

— 对应各种截留分子量,备有各种编码以供轻松识别的颜色可供选择。

— 结构材料为低结合聚丙烯。

— 超声焊接密封,防止侧流或密封不严。

— 适用于配合1.5mL试管的标准离心转子。

应用

— 寡核苷酸、DNA和RNA的浓缩、纯化及脱盐。

— 纯化标记和PCR反应。

— 从琼脂糖凝胶切片中分离DNA。

— 从丙烯酰胺凝胶中分离寡核苷酸和RNA。

— 如果要求去除引物,无论分子量大小为何,浓缩PCR产物时,都必须使用100K离心管。

处理能力

最大样本体积:500μL

最终浓缩体积:15μL

滤出液接收容器的容积:500μL

死体积 (滤膜/支撑物):<5μL

工作温度范围

0 - 40℃(32 - 104 °F)

pH值范围

Nanosep离心管:1-14

Nanosep MF(微孔滤膜)离心管:3-14

最大离心力

14,000 xg

离心机要求

转子配合1.5mL试管

消毒

产品提交时未经灭菌处理;使用前消毒,可使70%浓度的乙醇过滤。