测定奶粉中双氰胺

目前中国市场上进口的新西兰大包奶(包括脱脂奶粉、全脂奶粉)占到了中国总进口量的80%，而新西兰乳制品占到了中国全进口婴幼儿食品的40%左右。近日，媒体爆出新西兰出产的部分牛奶和奶粉中检测出少量双氰胺化学残留物，引起了很多人的关注。双氰胺化学名称为二氰二氨、二聚氰胺，白色结晶粉末。

本文建立了婴幼儿奶粉中双氰胺高效液相色谱分析方法，样品前处理过程简单、快速，方法定性定量准确，灵敏度高，完全满足检测要求。

1 实验部分

1.1主要仪器和试剂

LC 5500高效液相色谱仪：配有紫外检测器

DM-100在线脱气机

超声波水浴

离心机

乙腈

乙酸铵溶液(0.01mol/L)

乙酸

双氰胺净化管

双氰胺标准品(含量≥99.0%)

1.2色谱条件

色谱柱：Venusil HILIC，250 mm×4.6mm ，5μm。

流动相：乙腈+乙酸铵溶液(0.01mol/L，PH=4.20)=90+10，0.45 μm滤膜过滤。

流速：1.0 mL/min。

检测波长：220 nm。

柱温：30℃。

进样量：20 μL。

1.3试样处理

称取1g奶粉样品于50mL具塞离心管中，加2mL水，涡旋30s，加2ml乙腈涡旋30s。再加入2mL乙腈，重复上述提取步骤。将该提取步骤重复2次，得到共计约10mL的提取液。以4000r/min离心5min，取2mL上清液加入双氰胺净化管上下晃动30s，然后涡旋30s后，4000r/min离心10min，取全部上清液(约10mL) 于玻璃试管中，50℃下氮气吹干，加入50%乙腈水溶液，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，，待测。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线的绘制

2.1.1 标准溶液配制

双氰胺标准储备液：准确称取双氰胺标准品10mg于10mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，此标准贮备液浓度为1mg/mL。

双氰胺标准工作液： 吸取双氰胺标准贮备液1mL于100mL容量瓶中，用乙腈定容配成标准溶液浓度为10µg/mL。再分别吸取10µg/mL双氰胺标准溶液5.0、2.0、1.0、0.5、0.1mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，此标准工作液浓度为5.0、2.0、1.0、0.5、0.1µg/mL。

2.1.2 标准曲线

将双氰胺标准工作液依次按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

图1 双氰胺标准曲线谱图

2.2样品分析

将样品溶液按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，计算含量。

图2  1.0µg/mL标样谱图

图2  1.0µg/mL标样谱图

图3  某品牌奶粉添加1.0µg/g双氰胺谱图 

2.3 回收率实验

在样品中分别加入0.1、0.5、1.0mL的10µg/mL的标准溶液，按上述方法进行样品处理，得到回收率如下表所示。

表1 回收率实验

2.4 精密度实验

相同的条件下，取三份样品，分别加入0.5mL的10µg/mL的标准溶液，结果如下：

2.5 最小检出限

以3倍的基线噪声计算出检出限为0.4mg/kg。

3 结论

用LC-5500高效液相色谱分析婴幼儿奶粉中双氰胺的含量，峰形良好，重复性良好，该方法在0.1～10.0 μg/mL浓度范围内线性关系良好，回收率在95.1%～98.7%之间，满足分析要求。

奶粉中双氰胺检测实验系统配置

(高效液相色谱)

LC5500或LC5510(单泵)(或升级为双泵，组成高压梯度系统)

DM-100在线脱气机(选配)

AS-401自动进样器(选配)

溶剂过滤器(配备真空泵)

超声波清洗器