发布时间:2020-04-18 18:39 原文链接: 干式金属浴在沙门菌PCR检测方法中的应用

沙门氏菌在自然界有广泛的宿主,少数沙门氏菌对宿主有选择性,绝大多数对人和动物均适应,可寄居在哺乳类、爬行类、鸟类、昆虫及人的胃肠道中,种类繁多的家养和野生动物的感染率在1%~20%以上。故各种家禽、家畜在喂养、屠宰、运输、包装等加工处理过程中均有污染的机会。如家禽、家畜屠宰时的卫生条件差,肠腔的沙门氏菌就可污染肉类。此外,肉类等也可在贮藏、市场出售、厨房加工等过程中通过各种用具或直接互相污染,其中在零售市场购买的生肉有1%~58%污染了沙门菌。蛋类或蛋制品的污染来源,可以是禽类卵巢或输尿管,也可以由粪便、肥料、泥土中的沙门氏菌穿过完整蛋壳进入蛋内。一般在许多由蛋混合制成的蛋粉或其他制品中,感染率相当高;乳类及其制品如冰淇淋、袋装熟食等也会受到沙门氏菌的污染。以上各种动物源性食物是引起沙门氏菌感染的最常见媒介物。因沙门氏菌病经粪口途径传播,故摄入污染了沙门氏菌的食物或饮料感染方式。

什么是沙门氏菌?

沙门氏菌属(Salmonella)是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌统称为沙门氏杆菌。1880年Eberth首先发现伤寒杆菌,1885年Salmon分离到猪霍乱杆菌,由于Salmon发现本属细菌的时间较早,在研究中的贡献较大,遂定名为沙门氏菌属。现有67种O抗原和2000个以上血清型,所致疾病称沙门氏菌病。

与人类关系密切的沙门氏菌有:伤寒沙门氏菌(S.typhi),甲、乙、丙型副伤寒沙门氏菌(S.paratyphiA、B、C),鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium),猪霍乱沙门氏菌(S.choleraesuis),肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)等十余种。一般可简称伤寒杆菌,甲、乙、丙型副伤寒杆菌,鼠伤寒杆菌,猪霍乱杆菌,肠炎杆菌。

沙门菌PCR检测方法

由病原微生物引起的食物性疾病众多,且多事发突然。 探索,研究快速的检测方法,一直是科学家们致力的方向。常规的病原微生物检测需要数十小时至数天;普通PCR一般都是对被检标本先进行18-24h的增菌,然后再进行PCR测定;定量PCR虽然能将检测时间缩短到2-3h,但是对多种病原菌同时检测的效果还不够理想。为此,特地设立了沙门菌PCR检测方法,对实验过程进行了摸索和改进,大大提升了检测效率。

根据沙门菌hilA基因、志贺菌ipaH基因及副溶血性弧菌TDH基因设计特异性PCR引物,被检样品经4h 振荡后金属浴裂解制备DNA模板,使用全自动毛细管电泳核酸检测系统分析PCR扩增产物。该方法操作方便,分析时间短,特异性和灵敏度高, 可用于公共卫生突发事件食源性病原菌的快速检测。

在该实验中,金属浴的控温稳定性是实验的必备条件。奥豪斯多功能干式金属浴就非常适用于具有温度稳定需求的应用。其试管和模块壁紧密接触,可最大限度提高保暖性,提高加热效率。以下,就让小编为您介绍吧:

实验室的控温专家 ——奥豪斯干式金属浴

金属浴也叫干式恒温仪,恒温干浴器,和水浴原理都是一样的,只不过导热物质由水换成了金属,一般是模块化的金属块,和水浴比较起来升降温速度都快很多,而且金属块更容易灭菌,体积也小,便于在操作台等局限性空间内使用

金属浴广泛应用于样品的保存、各种酶的保存和反应、核酸和蛋白质的变性处理、PCR 反应、电泳的预变性和血清凝固等。

奥豪斯多功能干式金属浴非常适用于具有温度稳定需求的应用。大功率的恒温模拟控制型号属于经济型号,数显控制型号可提供卓越的温度均匀性与稳定性,适用于需要重复结果的应用,40多个模块供选择。

特点


 

模拟控制型号温度的准确度为设定温度的+/-1.0°C,数显控制型号温度的准确度为设定温度的+/-0.1°C,两种型号均可提供0.1°C的卓越的温度一致性。


数显控制型号的金属浴允许用户温度校准组件校正模块的温度,可实现LED屏显示的温度值和外部温度校准组件显示温度值保持统一。



数显控制型号操作面板配有分别显示温度和时间的独立LED屏。所有型号均采用了微处理器,温度的准确度控制在±0.1°C,以提供可重复结果。


















参考文献:

肖勇,吴家林,凌霞,张敬平,倪陪华,沙丹 《沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌多重PCR检测方法的研究》1.无锡市疾病预防控制中心,浙江 无锡 214023; 2.上海交通大学,上海 200025