发布时间:2020-05-12 19:35 原文链接: MTT法与CCK8法综合优势比较

CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。

MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。

CCK-8法的优点:

1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;

2、CCK-8法能快速检测;

3、CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;

4、CCK-8法的重复性优于MTT法;

5、CCK-8法对细胞毒性小;

6、CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。

CCK-8法的缺点:

1、与MTT法相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。

2、CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。

CCK-8法和MTT法的区别


CCK-8法或称WST-8法

MTT法

1

还原后的Formazan是水溶性的 
(不需要溶解)

还原后的Formazan是非水溶性的 
(需要加有机溶剂溶解)

2

重现性好

由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Formazan,故有时重复性略差

3

操作简便

操作繁琐

4

测定波长:450~490nm

测定波长:550~600nm

5

为1瓶溶液,无需预制,即开即用

由于需要加有机溶剂溶解,工作量比较大

 

如何选择合适的CCK-8检测试剂盒

目前市面上能提供的【CCK-8】细胞增殖/毒性检测试剂盒有国产分装或原产的,国产分装的CCK-8试剂盒在质量稳定性上有不足。而原产于国内实验室的CCK-8试剂盒有些具有较好的检测结果,在批次之间的稳定性上较难控制。至于原装进口供应CCK-8试剂盒的进口品牌并不多,就连Abcam、Thermo,Sigma等等几个品牌都不能够提供CCK-8试剂盒,而其它品牌在性价比上远逊于Abbkine产品。

作为Abbkine品牌旗下首款细胞分析旗舰产品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研发工程师为其倾注了大量的投入,不断摸索优化最佳的配方,每一份努力只为让科研工作者更加简单,高效,稳定地获取珍贵的科研数据。

本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。