电泳:在直流电场中,带电荷的粒子向带符号相反的电极移动,称为电泳。电泳也是一种分离的方法和技术,就是分离和鉴定混合物中带电粒子(包括离子、高分子多电解质、胶体粒子、病毒颗粒以致活的细胞,如细菌和红细胞等)的技术。
电泳装置:由电泳仪(电源)和电泳槽(混合样品电泳时的支持物)组成。
电泳仪(电源):为混合样品电泳时提供直流电场。电泳仪可提供恒定电压、恒定电流和恒定功率。
电压分为:高压>1500V;中压 500-1500V;低压<500V
电流分为:大电流>500mA;中电流 100-500 mA;小电流<100 mA
功率为分:大功率>200W;中功率 60-200W;小功率<60W
选择何种规格的电泳仪(电源)视电泳类型及样品分子量大小。
通常高电压电泳适用于分离小分子质量物质,如氨基酸、肽、抗生素等。
恒定功率电源适用于做等电聚焦电泳。
大电流适用于做转移电泳。
低电压电泳适用于琼脂糖凝胶电泳法分离大分子核酸。
电泳槽:常用的电泳槽有垂直电泳槽(主要用于分离蛋白质)和水平电泳槽(主要用于分离核酸样品)。为蛋白质和核酸的分离而设计的平板电泳仪,通常有水平和垂直平板二类。蛋白质的电聚焦和免疫电泳常采用水平板电泳形式,而蛋白质的其他形式区带电泳电泳则常采用垂直板电泳形式。特别是使用不连续体系冲液进行电泳时,垂直板电泳要比水平板电泳简便得多。实验室普遍使用的一种垂直板电泳。2块平板玻璃,根据电泳仪的大小裁定。其中一块上端开槽口,一般槽口的大小比例是:如果平板玻璃是17cm*19cm标准平板,那么所开槽口的大小是深2.0cm,长14cm。平板玻璃厚度常用3mm。2块平板玻璃之间、左、右、下3边加上垫片(又称隔条)就可组装成一个平板凝胶模。为了防止凝胶溶液渗漏和制成一块厚薄均匀的平板凝胶,必须使用强有力的夹子,将二块平板玻璃夹牢。垫片的厚度决定平板凝胶的厚度,最常用的是1.5mm厚。在平板凝胶膜中,灌浇凝胶溶液至一定高度后,插入加样梳,就可制成加样槽。加样槽体积的大小决定于加样梳齿的大小。因此,利用改变加样梳齿的多少和大小,就可方便地获得需要的加样槽。
水平板型电泳槽是目前进行琼脂糖凝胶电泳使用最普遍的装置。水平板型凝胶通常在一块可安放电泳槽平台的玻璃板或两侧带有挡板的胶模上灌制。如用玻璃板,则灌胶前需用胶带纸或医用胶带将四周贴成一个围墙,以防胶液渗漏。如使用与电泳槽配套购置的制胶模,则只需在灌胶前封住两端。
电泳类型:滤纸电泳、醋酸纤维素膜电泳、淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
电泳目的:电泳技术广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、酶、多肽、激素类、嘧啶和其他有机化合物甚至无机离子的分离、鉴定、纯化、制备。
电泳技术使用领域:凡涉及到生物科学、生物技术、生物制药、生物工程(遗传工程、细胞工程、蛋白质工程)的高校,如生命科学学院、农学院、医学院,及有科研能力的医院、生物工程公司等都离不开电泳技术。
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