光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光， 400nm～780nm之间的光可被人眼察看到，大子780nm称为红外光。人们只所以可以看到颜色，是由于光映照到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是由于植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
检测单位：
光经过被检测物，前后的能量差别即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。依据Bouger-amberT-beer规律，OD值与光强度成下述关系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算：
E＝OD=C×D×E
C为检测物的浓度
D为检测物的厚度
E为摩尔因子
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质可以吸收最多的光能量。假如选择其它的波长段，就会形成检测结果的不精确。因而，在测定检测物时，我们选择特定的波出息行检测，称为丈量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消弭这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消弭这个不精确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差能够消弭非特异性吸收。
Anthos 酶标仪检测值计算
仪器中的检测器接纳透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实践检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值
的计算如下：
T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0％的状况下检测的二进位数值， Max为在100％的状况下检测的二进位数值，举例如下：
MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
Anthos 酶标仪的中心定位
仪器会自动对酶标孔停止中心定位，中心定位是要消弭酶标孔底的凸凹惹起的厚薄不均带来检测的不精确。在对每一个酶标仪停止检测时，仪器其实要停止35个点的丈量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
光源的参照通道
参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
酶标仪的用处和其它提示
用于ELISA试剂的测定，普遍用于各种实验室，包括临床实验室。
质量控制
质量控制是试剂检测的重要要素。请依照试剂阐明书的请求停止质量控制。
空白校正
有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请依照试剂盒的阐明书请求停止。
检测结果的解释
由于有相当多的要素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会形成OD值的不，因而，只要运用同一酶标板反响的试剂检测结果才干比拟和剖析。对结果的临床解释请按照试剂盒的阐明书停止。
酶标仪的运用留意事项
1、工作环境
酶标仪是一种精细的光学仪器，因而良好的工作环境不只能确保其精确性和稳定性，还可以延长其运用寿命。依据DIN VDE 0871条例，仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。根据DIN 45 635 －19条例：
仪器应放置在低于40分贝的环境下。
为延缓光学部件的老化，应防止阳光直射。
操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间。
操作电压应坚持稳定。
操作环境空气清洁，防止水汽，烟尘。
坚持枯燥、洁净、程度的工作台面，以及足够的操作空间。
2、操作留意事项
酶标仪的功用是用来读取酶联免疫试剂盒的反响结果，因而要得到精确结果，试剂盒的运用必需标准。许多医院在运用酶标仪之前是经过目测判别结果，操作过程随意性较大，在运用酶标仪后假如不能及时纠正操作习气，会形成较大误差。在酶标仪的操作中应留意以下事项：
运用加液器加液，加液头不能混用。
洗板要洗洁净。假如条件允许，运用洗板机洗板，防止穿插污染。
严厉依照试剂盒的阐明书操作，反响时间精确。
在丈量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
请勿将样品或试剂洒到仪器外表或内部，操作完成后请洗手。
假如运用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严厉依照试
剂盒的操作阐明，以防对操作人员形成损伤。
假如仪器接触过污染性或传染性物品，请停止清洗和消毒。
不要在丈量过程中关闭电源。
关于因试剂盒问题形成的丈量结果的偏向，应依据实践状况及时修正参数，以到达最佳效果。
运用后盖好防尘罩。
呈现技术毛病时应及时与厂家联络，切勿擅自拆卸酶标仪。
酶标仪及洗板机选购指南
酶标仪（Microplate Reader）是对酶联免疫检测（ EIA）实验结果停止读取和剖析的专业仪器。酶联免疫反响经过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物停止的，反响结果以颜色显现，经过显色的深浅即吸光度值的大小就能够判别标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪普遍地应用在临床检验、生物学研讨、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健范畴中应用越来越普遍，同时促进了生殖安康技术程度进步 。
目前国内许多计生站系统展开了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优 育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测办法，报出的结果缺乏科学的根据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规则为：阴性对照品的 OD 值×2.5，经过目测无法判别标本孔的反响颜色能否超越临界值。肉眼停止两孔之间的颜色比拟可能还行，但比拟一孔的颜色能否超越另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和方案生育系统等屡次强调酶标仪的重要性，并请求酶联免疫检测试剂应运用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应运用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒阐明书没有是让用目测的。同时酶免检测的 项目常常是一些本质性的感染和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更请求严谨，由误诊惹起的纠葛很难处置。另外，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等 EIA 试剂检测是防止因输血惹起感染引发的医疗事故纠葛的必要手腕，正逐步被许多单位所采用。
我国免疫诊断办法主要有如下三种：酶免（EIA）、放免（RIA）和发光，在市场上的状况如下：
办法
所处市场周期
放免
衰退期
酶免
生长期
发光
进入期
放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐步被淘汰，而化学发光试剂和设备比拟昂贵，使得其在国内的提高特别在计生系统提高需求较长时间，EIA 技术稳定，试剂价钱合理，供给充，酶免技术在中国市场处于生长期，因而购置酶标仪正适宜宜。
特别要提到的是，在中国的方案生育和妇幼保健系统装备酶标仪曾经火烧眉毛。早在几年以前, 世界卫生组织已倡议对孕妇停止 TORCH五项常规筛查，但是遗憾的是由于缺乏酶标仪和洗板机等设备，RCH的检测在中国还未能普遍展开。TORCH 感染在围产医学中称为TORCH综合症，由于孕妇, 胎儿和重生儿都易被感染, 它已遭到全世界妇产科和儿科的极大注重。妊娠期感染不只危害母体，常常还可对胎儿和重生儿产生严重影响。经过胎盘可惹起子宫内感染而招致流产、早产、死胎或胎儿生长缓慢和畸形，经过产道和母乳可惹起重生儿感染。如累及神经系统可形成不同水平的智力障碍以及各种瘫痪、失聪、失明等严重后遗症，影响人口素质，因此 TORCH 感染与优生优育有极为重要的关系。因而，RCH（IgG和gM）检查通常也称为优生优育十项检查。目前，TORCH的检测办法主要有放免（RIA）和酶免(EIA)。由于放免办法需求特殊仪器，且有放射危害，目前正被酶免（EIA）办法取代。EIA办法具有特异性强，灵活度高，简单快速，本钱低等优点，只需装备有酶标仪和其他相应的设备 ，多数普通实验室均可便当地展开 。 很显然, 尽快在计生系统提高酶标仪等设备是一个迫切的需求。
这项工作的落实将有助于进步诊治程度，降低母婴发病率，从而进步整个国民的安康素质。目前市场上提供的EIA试剂越来越多，如：T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各种癌症标志物、伤寒、副伤寒等，另外经过母婴传播的性传播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎（如HBV、HCV)，以及胎儿的抗体，重生儿TSH的测定，疫苗反响等，市场上也都有成套 EIA 试剂盒供给。运用酶标仪有利于拓展检测项目，进步检测程度，其社会效益和 经济效益并举。
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