发布时间:2020-08-17 17:45 原文链接: 葡萄糖氧化酶的测定

实验方法原理

GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶。


酶实验是通过与过氧化物酶(POD)偶联的一个反应序列中进行的,其供体是邻联二茴香胺:


实验材料 过氧化物酶

试剂、试剂盒 磷酸钾邻联二茴香胺葡萄糖

仪器、耗材 分光光度计

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


0.98 ml 实验混合物


0.02 ml 酶样品


记录在 25℃ 时 436 nm 处吸收值降低。ε436=8300 l/(mol·cm)。


注意事项

其他

试剂:


0.1 mol/L 磷酸钾,pH7.0


邻联二茴香胺[二氯化邻联二茴香胺,Mr=317.2, 是固态致癌物,准备 1 ml 25 mmol/L 水溶液(7.9 mg/ml) 并且溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0,用 O2 使其饱和 10 min]


0.5 mol/L 葡萄糖(Mr=180.2,90 mg/ml)


过氧化物酶(POD, 从山葵中提取,使用前用 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 120 U/ml)