1、培养用液：
HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS（ph7.4）。
酶消化液。用HBSS配制，含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。
细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和50/ml链霉素、25ug/mlDNA酶1的L15培养基。
生长培养基。为低糖DMEM培养基，含有15%鸡胚浸出液、20ng/ml重组人bFGF、1%N2添加剂、2%B27添加剂、50umol/L2-巯基乙醇、35mg/ml维甲酸、50U/ml青霉素和50ug/ml链霉素。
多聚D-赖氨酸溶液。先用培养用水配置成10mg/ml的储存液，-20℃保存。
使用时用硼酸盐缓冲液稀释成10ug/ml的浓度。
易生物试剂库：
2、细胞的分离和培养步骤：
孕期14-17天SD大鼠，用戊巴比妥(65mg/kg)腹膜下注射麻醉，腹部用75%乙醇消毒后，打开腹腔，取出子宫，小心的剪开子宫取出胎鼠。
将胎鼠脱颈处死后，在解剖显微镜下获取坐骨神经，置于预冷的HBSS中。
用1ml酶消化液在37℃条件下酶解4min，然后加入2倍体积的细胞分散液终止酶解反应。
经1000r/min离心5min后，弃去上清，沉淀细胞中加入细胞分散液，用吸管吹打分散，制成单细胞悬液。
为了获得神经嵴干细胞，将分离的坐骨神经细胞悬浮于1：2000稀释的P0单克隆的抗体（P07）中，置冰浴20-25min，经离心漂洗后，再与藻红蛋白偶联的抗小鼠IgG1二抗反应。细胞经离心漂洗后，再与偶联荧光素的抗P75IgG抗体（192）反应，细胞经漂洗后，用含有2ug/ml7-氨基放线菌素D（7-AAD）的培养基进行活细胞染色。
采用流式细胞仪分选出P75+/P0-的细胞。
细胞接种于用多聚D-赖氨酸和0.15mg/ml人纤黏连蛋白包被的6孔培养板，加入生长培养基2ml，置37℃含6%CO2及饱和湿度的培养箱中培养。
在上述培养系统中，分离的细胞在4天之后经特异免疫染色，可见有外周神经元、施万细胞和平滑肌样的肌纤维母细胞。P75+的细胞具有多向分化的潜能，但若p0蛋白表达也为阳性的细胞则多向分化的能力降低，而p75-/p0+的细胞则只能分化成施万细胞和肌纤维母细胞，p75-/p0-的细胞只能分化成肌纤维母细胞。因此要从坐骨神经获得神经嵴干细胞必须分选p75+的细胞。在培养时使用16nmol/L BMP2，能加速神经元的分化并增加神经元的比例。若使用1nmol/L胶质细胞生长因子（NRG1），在培养14天后，95%以上细胞分化为施万细胞，而未见有神经元的存在。而若使用TGF-β，细胞的存在能力欠佳，但存活的细胞中SMA阳性的肌纤维母细胞比例很高。