脂肪酸是构成脂肪的主要成分,是对生物体提供热量的重要物质。近年来,由于鱼体脂肪酸(鱼油)的营养特性及其对人体具有特殊功效,越来越受到人们的重视,而鱼卵中脂肪含量大于鱼肌肉中脂肪含量,营养价值较高,因而对其进行快速准确地分析就显得尤为重要。
传统的鱼卵中脂肪酸测定大多利用测定粗脂肪后的废液进行衍生化,即采用先将鱼卵烘干后,用石油醚进行索氏提取,而提取液的回收和蒸发往往造成低分子脂肪酸的损失,而且由于提取时间较长,易造成不饱和酸的氧化;脂肪酸测定的国标法为填充柱气相色谱法,而填充柱气相色谱经常会出现试样中不同脂肪酸甲酯具有非常相近保留时间的现象,从而容易引起定性判断错误,特别是碳原子数相同而双键数量不同的分子量非常接近的脂肪酸更加如此。
可采用氯仿—甲醇改良法进行脂肪提取,用氢氧化钠—甲醇酯交换法在室温下甲酯化,用毛细管气相色谱法分析其脂肪酸甲酯,同时采用外标法进行定量分析。
色谱条件
分析仪器:气相色谱仪(带FID检测器)
色谱柱:30m×0.25mm×0.53µm弹性石英毛细管柱
载气:氮气 柱流速:2.5mL/min
进样口温度:230℃ 分流比:20:1
检测器温度:270℃ 尾吹:50mL/min 氢气:空气=40mL:450mL
程序升温:120℃保持3min,10℃/min,终温200℃:,保持25min
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