所有色谱峰均展宽的可能原因及解决方法

一、样品量过载

稀释样品或减少进样体积使色谱柱恢复平衡。注意：使用强度较弱（相对于流动相而言）的样品溶剂，进样体积可以达到色谱柱死体积的10%左右；而使用强度较强的溶剂，进样体积可能高仅为柱死体积的1%。

二、室温变化过大

需要使用色谱柱恒温箱，以保证色谱柱温度恒定。

三、系统没有达到平衡

请保证色谱柱、检测器等有足够的时间平衡。如果是梯度洗脱，两次进样间保证足够的时间使系统重新达到平衡。色谱柱次使用离子对试剂时，要有充足体积的流动相和足够的冲洗时间确保色谱柱充分平衡。

四、色谱柱问题

若色谱柱问题可能会导致多种谱图异常情况。色谱柱被污染，如果是因为色谱柱被污染导致了问题的出现，则应按照相关方法冲洗色谱柱，如果这样做仍不能使问题得到解决，则需更换色谱柱；色谱柱柱效下降，如怀疑因色谱柱柱效降低导致，则要用一支柱效好的色谱柱更换当前色谱柱，然后用一系列标准样品进行测试，比较保留时间的重复性，如果保留时间是重复的，则表明原来的色谱柱柱效已经下降，需更换色谱柱，如果保留时间不稳定，则问题可能出在流动相混合不均匀、溶剂或保护柱、在线过滤器被污染等；如果系统中使用了保护柱，在测试柱效时应将其卸下，保护柱也可能是污染源，所以在更换色谱柱的时候有必要将保护柱一同更换。

五、色谱柱选择不当

检查使用的色谱柱内径和填料是否正确。

六、保护柱问题

更换被污染的或者柱效下降的保护柱后再测试色谱柱的柱效，正常情况下柱效应该是上升的。如果不是，应按照前面讨论的方法检查色谱柱是否被污染或柱效是否下降。

迅速诊断提示：所有的色谱峰都展宽通常是由于仪器或色谱柱选择不当而造成的。一般要先检查色谱柱和保护柱，因为它们是系统的核心组成部分，需要重点排查。