生物安全柜工作原理是空气由前窗操作口进入 负压风道与柜体内空气充分混合后，由风机送入静压箱，经高效过滤器过滤后以垂直层流的状态进入操作区，操作区左右及后部墙体均为负压风道，使工作区与外部环境形成气幕及箱体双层隔离。
同时工作区被负压包围，保证样品不发生泄漏，操作区的气流由于风机的作用，通过负压风道与前窗操作口进入的空气混合后。
其中部分混合气体（约70%）由风机送入静压箱循环使用，其余混合气体（约30%）经排风高效过滤器过滤后排出柜体。
