在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素:①该目的基因应不含内含子;②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列;③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如Kozak 序列),通常认为其上游 -3位的碱基为A时最佳;④去除mRNA 3′端的非编码区的非必需序列;⑤若用非融合型转移载体,基因需含自身的ATG启始密码,若用融合型转移载体则不必带上;⑥转移载体中已含有多聚腺苷酸加尾信号,外源基因无需再带上这类信号;⑦如果表达产物的信号肽不能被杆状病毒表达体系有效去除时,可考虑去除这类信号肽;⑧若表达产物不能稳定表达时,可对其N端进行改造或表达融合蛋白。 除此以外,细胞的种类和生理状态也是重组病毒繁殖的关键因素。蛋白质的低水平表达可能还与转录后加工、蛋白质转运、以及蛋白质本身的性质相关,可以采用融合表达来解决。
5月15日,国际学术期刊JournalofVirology(《病毒学杂志》)在线发表了中国科学院武汉病毒研究所/病毒学国家重点实验室王华林、胡志红团队的最新成果,论文题为Themajorhurdlef......
近日,中国科学院武汉病毒研究所曹晟课题组在杆状病毒衣壳蛋白组装体结构及应用方面取得新进展。研究发现杆状病毒衣壳蛋白可以在体外条件下可控地组装为柔性纳米管,该纳米管具有两种明显不同的组装形式,可以作为纳......
合成生物学技术作为21世纪的一门新兴生物学技术,推动了生命科学乃至整个自然科学领域的发展。病毒的人工合成为深入揭示病毒的本质和功能,以及病毒的遗传改造提供了强有力的工具。以往,对病毒人工合成的探索主要......
【摘要】目的对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体进行表达、纯化及初步鉴定。方法用含Fc片段抗2HBsAgFab抗体基因的载体pAC2HBs2Fc,与杆状病毒线性DNA共转染昆虫细胞sf9......