通常而言，如果你想做一个突变体鉴定实验，那么模版质量要求可适当放宽，只要cRNA反转录成功即可。但如果你要做一个厉害的标记基因鉴定，并且想要达到传说中“三线合一”的境界，那么模版质量就另当别论了。
首先，RNA要经过严格的定量（因为反转成cDNA后，反转时加入的dNTP会严重干扰定量结果，因此对cDNA定量是没有意义的）。尽量取等量的、未降解的RNA进行反转录（并选择含有DNAase的试剂盒）。
反转好的cDNA模版需一次性稀释20-30倍，不可长期保存，每次用时前先混匀再离心。qRT-PCR实验最好在一个星期内完成。