色谱柱的孔径如何选择？

　　测量法和表示

　　孔径分布和比表面积可以通过相同的方法来测量，如：氮吸附法和汞空隙率测定计平均孔径也能通过逆向分子排阻法来测量，但真正的孔径分布不能用个方法来测量。不过，因其它方法存在一些问题，高聚物填料仍然要采用逆向分子排阻法。孔径用nm或埃做单位。孔径分布的值是标称的，而且不同生产商有不同的方法。所以，某生产商标称10nm的可能与另一生产商标称8nm或12nm的相同。

　　孔径与保留

　　孔径是填料物理性质的一个基本因子，并决定颗粒相比率（phase ratio）。进一步决定了填料的保留性质和载样量。

　　孔径和分子量

　　 被分析物分子小随分子量增加而增大。如果其分子量大小约为孔径的三分之一或大，则传质会严重受阻并造成低效能和峰展宽。这样的情况下，要用更大孔径的填料。对所有标准分析问题，通常用孔径在大概6nm到13nm之间的填料。更大孔径的填料也可以用在肽类分离上。分子量比肽更大的，如蛋白质，用30nm孔径的填料更加合适。但这样的填料与小分子作用的不好，因为比表面积减少了。对被分析物分子量小于3000的，应用孔径小些的。被分析物分子量大于10000的，应用孔径30nm的填料。分子量介于3000到10000的，大的小的都可以得到满意结果。

　　孔径分布

　　 大HPLC填料的孔径分布跨度有一个数量级。这样的分布对大多数实用目的已经足够的窄了。然而，微孔的减少时填料的性能提高了。这可能是有窄孔径分布的填料如Waters Spherisorb的一个优势。

　　非孔填料

　　 非孔填料能用于高分子量的、在大孔径填料中表现出扩散受限制的被分析物。但是，只能得到有限的比表面积。

　　选择正确的孔径

　　被分析物的分子量 推荐使用的填料孔径

　　<3000 6到13nm

　　3000到10000 10nm

　　>10000（例如蛋白质） 30到100nm