微板式化学发光酶免疫分析法临床测定人血清中孕酮

《分析化学》2008年06期   
  微板式化学发光酶免疫分析法临床测定人血清中孕酮
  任世奇;王栩;唐宝军;胡国茂;李振甲;陈国南;林金明
  　　将抗兔IgG(即二抗)物理吸附于聚苯乙烯微孔板上作为通用固相,通过免疫反应制备固相抗体。采用辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种高通量、简便、快速的化学发光酶免疫分析方法用于临床测定人血清中的孕酮。对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、发光底物选择、发光反应时间及温育条件等进行了考察和优化,最终选定的实验条件:孕酮抗体和HRP标记物的最佳稀释度分别为1∶100000和1∶15000;选用Ⅱ号发光底物,发光反应10min后测定;37℃水浴条件下温育1h。对建立的方法进行了评价。该方法的灵敏度为0.08μg/L;批内和批间相对标准偏差均在15%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为101%、101%和94.4%(在87.8%～108%之间)。使用本方法和经典的放射免疫法同时对36份人血清样品进行测定,结果显示,本方法与放射免疫分析方法相关性良好,其相关系数为0.9502。
【作者单位】：福州大学化学化工学院 福州350002(任世奇;陈国南);清华大学化学系 北京100084(王栩;林金明);北京科美东雅生物技术有限公司 北京100094(唐宝军;胡国茂;李振甲)
【关键词】：孕酮;人血清;化学发光酶免疫分析;辣根过氧化物酶
【基金】：国家863计划(No.2006AA02Z4A8);教育部创新团队(No.IRT0404)资助项目
【分类号】：R446.6
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-06-007
【正文快照】：
　　1引言孕酮(progesterone)亦称黄体酮,是天然的孕激素,由卵巢和胎盘产生,分子量为314D,它与雌激素共同维持女性生殖周期及女性生理特征[1]。动态监测血清中的孕酮含量,有助于判定排卵期,了解黄体功能,研究各种类固醇避孕药及抗早孕药的作用机理[2,3]。此外,近年来研究表明,孕酮