原理:westernblotting转膜一般采用“滤纸-凝胶-膜-滤纸”夹心法,凝胶靠近负极,膜靠近正极。因为蛋白上结合有sds,因而带负电,在电流的作用下会从负极向正极运动,从而转移到膜上。
VDF膜一定要在纯甲醇里浸润的!不然蛋白结合不上去。在100%甲醇里短暂浸润,其目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合。小分子及大分子量的蛋白转移时,多加或不加甲醇也是......