目的请求
1．控制普通培育基制备的准绳和请求。
2．熟习普通培育基制备的过程。
操作步骤
一、培育基的制备准绳和请求
培育基是依据各类微生物生长繁衍的需求，用人工办法把多种物质混合而成的营养物。普通用来别离、培育菌类。常用的培育基有根底培育基、增菌培育基、选择培育基、鉴别培育基和厌氧培育基。在制备培育基时，应控制如下准绳和请求：
（一）培育基必需含有细菌生长繁衍所需求的营养物质。所用的化学药品必需纯洁，称取的份量务必精确。
（二）培育基的酸碱度应契合细菌生长请求。按各种培育基请求精确测定调理pH值。多数细菌生长的适合pH值为7.2～7.6，呈弱碱性。
（三）培育基的灭菌时间和温度，应依照各种培育基的规则停止，以保证灭菌效果及不损失培育基的必需营养成分。培育基经灭菌后，必需置37℃温箱中培育24小时，无菌生长者方可应用。
（四）所用器皿须干净，忌用铁或钢质器皿，请求没有抑止细菌生长的物质存在。
（五）制成的培育基应该是透明的，以便察看细菌生长性状以及其他代谢活动所产生的变化。
二、培育基制备过程
不同的培育基其制备办法也不同，普通包括以下步骤：
（一）精确称量试剂 依据不同的菌类和用处，选择适合的培育基，培育基所需试剂必需纯洁。
（二）校正pH值 将称量好的培育基各种成分放入容器内，标志划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精细试纸或酸度计测定。用1N
NaOH和1N HCl调理pH值到适合范围内。
（三）过滤 将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培育基倒入其中过滤至透明。
（四）分装 将过滤后的培育基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。
（五）灭菌
培育基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。普通微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才干到达彻底灭菌的目的。依据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因而，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热状况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，由于蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。
高压蒸汽灭菌，普通采用15磅／平方（即1.05kg／cm2）压力，此时的温度是121.3℃。灭菌20～30分钟后，可到达完整灭菌的目的。在停止灭菌的时分，首先要把灭菌锅内的冷空气排出，否则，冷空气存在会降低锅内的实践温度，影响灭菌效果。
三、根底培育基的制备
（一）牛肉浸液（肉水）
1．成分 新颖牛肉 500g ，水1000 ml。
2．制法
（1）取新颖牛肉，剔除肌膜、脂肪，切成小块，用绞肉机绞碎。
（2）按上述比例加水，浸泡过夜（夏天应将浸泡液放置在低温的中央，避免糜烂；假如没有冷藏条件时，可省去浸泡过夜这一步），其间应搅拌数次。
（3）次日取上液煮沸一小时，并不时搅拌。
（4）补足蒸发的水分，用白布或绒布过滤后分装于三角瓶中，准备灭菌。
（5）置高压灭菌器内，15磅灭菌20～30分钟，置低温、暗处保管备用。
3.用处
用于制备各种培育基的根底液。
（二）肉浸液肉汤（普通肉汤）
1．成分 肉水 1000 ml ，蛋白胨 10g，氯化钠 5g，磷酸氢二钾 2g。
2．制法
（1）将以上成份加温溶于牛肉浸液中。
（2）调pH值为7.4～7.6。
（3）滤纸过滤后分装。
（4）15磅20～30分钟灭菌后备用。
3．用处 作普通细菌培育用。
（三）营养琼脂培育基（普通琼脂）
1．成分 肉水 1000ml，蛋白胨10g，磷酸氢二钾 lg ，氯化钠 5g，琼脂 20g。
2．制法
（1）将上述成分混合后，加热溶解，补足水份。
（2）校正pH值7.4～7.6。
（3）用纱布夹棉花过滤。
（4）分装于中试管或三角瓶中。
（5）高压灭菌20～30分钟后，将中试管摆成斜面，保管备用。
3．用处 普通细菌别离培育、菌种保管或用作特殊培育基。
（四）半固体培育基 根本上与营养琼脂的制备相同，仅将琼脂量减少至0.5～0.7％（1000 ml中加5～7g琼脂）即可。
（五）鲜血琼脂
将灭菌的营养琼脂加热溶化，冷却至45～50℃时，参加5～8％无菌脱纤鲜血（绵羊、黄牛、马和兔等），分装于试管后立刻摆成斜面、或倾注于平皿中，待凝固后，置37℃培育1～2日。有污染者废弃；无菌者保管，置冰箱备用。
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