取肝素抗凝血1ml加Hanks 液1：1 稀释后，沿管壁徐徐滴流叠加盛有2ml淋巴细胞分离液的试管内（注意勿与分离液混合，然后2000r/min 水平离心20min，管内分为4 层，自上而下依次为血浆，单个核细胞，颗粒白细胞、红细胞（图2—1）。用毛细管伸至单个核细胞层中（位于细胞分离液与血浆的界面上），沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks 液洗两次，每次2000r/min 离心10min，最后用RPMI l640 培养液将细胞配成2×106/m1 的细胞悬液备用。
