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整理的PCR资料.供大家分享.2

引物设计简介1.寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用设计粗糙的引物,产物将很少甚至没有;而使用正确设计的引物得到的产物量可接近于反应指数期的产量理论值。当然,即使有了好的引物,依然需要进行反应条件的优化,比如调整Mg2+浓度,使用特殊的共溶剂如二甲基亚砜、甲酰胺和甘油。计算机辅助引物设计比人工设计或随机选取更有效。一些影响PCR反应中引物作用的因素诸如溶解温度、引物间可能的同源性等,易于在计算机软件中被编码和限定。计算机的高速度可完成对引物位置、长度以及适应用户特殊条件的其他有关引物的变换可能性的大量计算。通过对成千种组合的检测,调整各项参数,可提出适合用户特殊实验的引物。因此通过计算......阅读全文

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引物设计简介1.寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用

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PCR实验技巧增加PCR的特异性:1. prime理想的,只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60%c. 5'端和中间序列要多

花了2星期系统归纳关于PCR的各位老师旧帖,与大家分享

常规PCR一般注意点:1)PCR模板是关键,引物可以优化。制备模板的时候,一定要注意核酸模板的纯度和量。纯度上要避免杂质和杂蛋白质的混入,同时还要注意添加模板的量,模板很理想的话,不用加太多,加的多了,混进去的杂质机会就多了。当模板的浓度过低,比如低于100个分子时, 引物和模板之间就很难发生反应.

关于色差仪的专业术语整理分享

差仪使用和分析过程中会有很多专业术语,这些术语一般不了解仪器的人不会特别清楚。为了更加熟悉和了解色差仪,我们把这些术语统一整理一下分享给大家看。    CIELABColorSpace(CIELAB色空间)    利用L*、a*及b*三个不同的坐标轴,替颜色在几何坐标图中,指示位置及代号。    C

简要整理分享直读光谱仪的样品磨样方法

  想必很多人都很少听过光谱仪,只有这个领域的人才知道光谱仪是什么。光谱仪就是以光电倍增管等光探测器测量谱线不同波长位置强度的装置。  光谱仪应用很广,在农业、天文、汽车、生物、化学、镀膜、色度计量、环境检测、薄膜工业、食品、印刷、造纸、喇曼光谱、半导体工业、成分检测、颜色混合及匹配、生物医学应用、

“中国科学家资料整理与研究中心”成立

  6月20日上午,“中国科学家资料整理与研究中心”(以下简称研究中心)成立仪式在中科院自然科学史研究所举行。中国科协党组成员、书记处书记王春法,中国科协调宣部副部长罗晖,中国科协发展研究中心主任、中国科协调宣部副部长王康友,研究所所长张柏春研究员等出席了成立仪式。研究所副所长王扬宗和罗晖分别代表双

elisa试剂盒实验基础资料分享

  面对新学期的开始,是不是让不少ELISA实验的新手同学们有点儿手足无措呢?在实验中有些不太懂的地方可以请教师兄或者老师,很多人在实验过程中,难免会遇到各种不同的问题,比如说正态分布及标准差,真值,质控血清如何使用,实验的效果不好等等。今天上海劲马实验室为您分享了elisa试剂盒实验基础

定量PCR实验技术分享

1.  如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决? ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。 解决办

定量PCR实验技术分享

1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决?ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。解决办法可以将模板加以浓

2D电泳资料合集

I. 2D电泳操作手册BIORAD英文版:http://www.people.cornell.edu/pages/ks349/2D/Biorad.pdfBIORAD中文版:http://www.people.cornell.edu/pages/ks349/2D/Biorad_ch.pdfBIORAD