长白猪精原细胞的分离和纯化

实验方法原理 酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。 实验材料 长白种系公猪 试剂、试剂盒 胶原酶 胰蛋白酶 脱氧核糖核酸酶 牛血清白蛋白 胎牛血清 RPMI 1640培养基 HE染液 PBS 仪器、耗材 ......阅读全文

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞,用于体外培养。资料表明,从成年啮齿类的睾丸分离粗线

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

长白猪精原细胞的分离和纯化

            实验方法原理 酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。 实验

长白猪精原细胞的分离和纯化

实验方法原理酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。实验材料长白种系公猪                                                

长白猪精原细胞的分离和纯化

一、材料和方法1、实验动物长白种系公猪,2月龄,由北京养猪中心苇沟现代化猪场提供。取活体睾丸,立即放入1640营养液中,待分离细胞。2、主要试剂及材料胶原酶(CLS,Sigma),胰蛋白酶(Sigma),脱氧核糖核酸酶(DNase,Promega),牛血清白蛋白(BSA,中国医学科学院天津血液研究所

长白猪精原细胞的分离和纯化

实验方法原理酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。实验材料长白种系公猪试剂、试剂盒胶原酶胰蛋白酶脱氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培养基HE染液PBS仪

细胞分离纯化技术

Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞             实验方法原理 常用来分离人外周血单个

分离纯化总RNA

1)      用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取纯化组织和细胞中的RNA1.      选取从组织细胞或细胞中提取RNA的适宜方法组织a.       分离组织并立即置于液氮中。b.      将约100 mg冰冻组织含液氮的研钵中,用研棒研磨。研磨过程中可加入液氮使组织保持冰冻状态。c.       

细胞分离纯化技术

Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞             实验方法原理 常用来分离人外周血单个

细胞分离纯化技术

实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性

分离纯化的流程

粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。

分离纯化的流程

粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。

分离纯化的流程

粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。

细胞分离纯化技术

Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(

生物分离纯化系统

  生物分离纯化系统是一种用于水产学领域的分析仪器,于2018年12月5日启用。  技术指标  系统泵:双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀,每个泵后都有润洗通路,润洗泵的柱塞杠,延长泵的使用寿命;流速0.001-25ml/min(单泵);装柱可以双泵模式运行,达到0.1–50ml/min;压力范围0

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

mRNA提取、分离纯化

从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之

mRNA的分离与纯化

 真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)

蛋白质分离纯化

蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。

微生物分离纯化

  微生物:分离纯化  含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(pureculture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。  1、倾

mRNA的分离与纯化

[实验原理]真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或

mRNA的分离与纯化

实验概要mRNA的分离与纯化实验原理  真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性

什么叫分离纯化技术

将混合物质通过各种分离方式进行提取。当然分离后的浓缩也是一个纯化的步骤。纯化方式有很多种,溶剂萃取,树脂,膜分离等等。

Poly(A)+RNA的分离纯化

1)      Poligo(dT)-纤维素层析法提取poly(A)+RNA装柱与填柱1.      取oligo(dT)-纤维素0.5~1.0 g,用0.1 mol/L NaOH重悬。2.      用oligo(dT)-纤维素(0.5~1.0 ml柱体积)灌注DEPC处理过的一次性柱子(或塞以无

内含肽的分离纯化

内含肽具自切割特性的这种特性而实现目标蛋白与亲和标签分离的目的。内含肽在蛋白质纯化中的应用修饰后(位点特异性突变)的内含肽经诱导能够介导N端或C端单侧肽键断裂。首先将编码亲和标签、内含肽及目标蛋白的基因序列连接在一起,在合适的宿主系统中表达出一个标签-内含肽-目标蛋白的三联体,利用修饰后的内含肽构建

酶的分离纯化步骤

酶的分离纯化一般包括三个基本步骤: 即抽提、 纯化、 结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液, 此时不可避免地夹带着一些杂质, 然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来, 或者从此溶液中选择性地除去杂质, 然后制成纯化的酶。

RNA的分离与纯化

包括Northern杂交在内的许多分子生物学实验均是以RNA为材料,mRNA的制备也需要一定质量的总RNA样品,RNA的数量、纯度与完整性将直接影响这些实验的结果。RNA中rRNA的数量最多,占总量的80%~85%;tRNA及核内小分子RNA占15%~20%;mRNA仅占1%~5%。由于各种rRNA