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液体细菌培养的步骤

以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种,菌种培养可用蒸馏水,生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种,则用天然海水配制培养基,注意在海水中加入磷元素时,不能用磷酸氢二钾,应用磷酸二氢钾,不然会产生大量沉淀。2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量,逐一溶解,混合,配成培养基。也可先配成母液,使用时按比例加入一定的量即可。(三)接种培养基配好后,应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高,一般为2......阅读全文

微生物学检验基本技术(2)

第六节 自动化技术在微生物检验中的应用  微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界

微生物学检验基本技术(2)

第六节 自动化技术在微生物检验中的应用   微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已

微生物检测基础操作汇总(二)

  1、倾注平板法  首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50°左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。  

MALDI-TOF MS结合短期培养法快速检测中段尿样本中的病原菌

细菌性尿路感染是临床最常见的泌尿系统感染之一, 中段尿培养是诊断尿路感染的金标准, 但传统的培养鉴定方法需要2~3 d才能得出细菌鉴定及药物敏感性结果, 影响了临床的及时诊疗。近年来, 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionizat

细菌培养及CaCl2法制备感受态细胞-2

[9].制作平板培养基:将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10ml,以铺满皿底为度。铺放培养基后放置15min左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,

血培养检测规范化操作

血培养检测 采血指征:     对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征: 1. 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。2. 寒战。3. 白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未

质粒提取实验方法

导论质粒DNA的小量制备质粒DNA的大量制备质粒DNA的纯化一、导论    已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA, 这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长  从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素

史上最全的血培养检测规范化操作

一、血培养检测 采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征: 1. 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。 2. 寒战。 3. 白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状

噬菌体培养法

一. 液体培养法1. 将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养,一般培养16~24小时2. 将噬菌体原液100 μl 与寄主细菌悬浮液300 μl均匀混合,静置15分钟使其感染。3. 将混合液接至含10 ml新鲜液体培养基的试管中,于适当温度下振荡培养约8~24小时,培养时间依噬菌体之不同而异。

质谱技术在临床微生物样本直接检测中的应用

  基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世纪80年代发展起来的一种新型软电离有机质谱, 作为一种新兴的蛋白

质谱技术在临床微生物样本直接检测中的应用

   基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世纪80年代发展起来的一种新型软电离有机质谱, 作为一种新兴的蛋白质组学

质谱技术在临床微生物样本直接检测中的应用

        基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世纪80年代发

MALDI-TOF MS在临床微生物样本直接检测中的应用

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世纪80年代发展起来的一种新型软电离有机质谱, 作为一种新兴的蛋白质组学检测技

微生物检测基础知识

微生物检测涉及多行业和领域,在实验室检测中有着重要的地位,今天和大家一起对微生物检测中的一些基础操作进行汇总和梳理! 接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。接种和分离工具1.  接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.

常用培养基的制备、细菌接种方法、细菌生长现象观察和...

常用培养基的制备、细菌接种方法、细菌生长现象观察和细菌的分布培养基的制备 原理 培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配置而成的一种混和营养基质,用以培养或分离各种微生物。因此,营养基质应当有微生物所能利用的营养成分(包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素)和水。根据微生物的种类和实

​细菌培养条件有哪些?

细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布极广,数量大,种类多,它可以造福人类,也可以成为致病的原因。大多数细菌可用人工方法培养,即将其接种于培养基上,使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是一个复杂的技术。中文名 细菌培养 培养条件 37℃中放18~24小

血培养检测规范化操作(世上最全基本操作流程)

一、血培养检测 采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征:1. 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。2. 寒战。3. 白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。4. 粒细胞减少(成熟

血培养检测规范化操作

一、血培养检测 采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征:1. 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。2. 寒战。3. 白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。4. 粒细胞减少(成熟

脓毒血症金标准-血培养操作规范

血标本的采集和培养 (一)血培养采集的时间 要求:对怀疑菌血症、真菌血症的患者,在考虑使用抗菌药物之前,应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间采集2套(每套包括1只普通血培养瓶及1只厌氧血培养瓶)以上血培养标本。 说明:实验数据表明细菌入血后约1小时,寒战和发烧开始

接种、分离纯化和培养技术

一、接种  将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法  在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面

植物组织培养知识概要

植物组织培养(Plant Tissue Culture):是指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体explant),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。(主要有原生质体(Protoplast),悬浮细胞,组织(愈伤组织Callus

分子生物学常用实验技术(page 1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

巨噬细胞吞噬功能和杀伤功能的检测

基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞:如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤],或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液(balanced salt solution, BSS)细菌(如单核细胞增多

细菌的培养方法及培养基的配置

一、目的 学习细菌的培养方法及培养基的配置。 二、原理 在基因工程实验和分子生物学实验中,细菌是不可缺少的实验材料。质粒的保存、增殖和转化;基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。 大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、

空气微生物采样器(一)

   当人的呼吸道由于寒冷、紧张、劳累等因素而出现抵抗力下降时,空气中的微生物就会乘虚而人,引起呼吸道疾病,如流感、白喉、感冒、支气管炎、肺炎等。当你的皮肤出现破损、伤口等时,空气中的微生物也会侵入皮肤,造成皮肤感染.如疖、痈或脚癣等。空气中的某些真菌,还是哮喘的罪魁祸首。&nb

巨 噬 细 胞 吞 噬 功 能 和 杀 伤 功 能 的 检 测

实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞:如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤],或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液(balanced salt solution, BSS)细菌(如单核

细胞培养的基本方法(二)

第四节 细胞计数及活力测定一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分

通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验

来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备,通常有两种方法:① 平板裂解,这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法;② 小量液体培养,这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备

λ噬菌体DNA提取试剂制备、操作步骤和注意事项

λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径:其一是裂解生长,环状DNA 分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体D

基因工程菌株的培养与观察

[实验原理]大肠杆菌是含有长约3000Kb的环状染色体的棒状细菌,它能在仅含碳水化合物(如葡萄糖,提供碳源和能量)和提供氮、磷、微量元素的无机盐的极限培养基上快速生长。如果用含氨基酸、核苷酸前体、维生素以及其它一些细菌不能合成的代谢成分的丰富培养基来培养,那么大肠杆菌会生长的更快。大多数应用于DNA