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利用纳升级液相色谱串联质谱进行蛋白质鉴定实验

实验材料 修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒 消化缓冲液萃取液清洗液脱色液仪器、耗材 多通道移液枪Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管实验步骤 3.1 胶内蛋白的水解和多肽的提取(一天的实验方案)对于从 SDS-PAGE,2D-PAGE,BN-PAGE 电泳(经考马斯亮蓝 G-250 染色)得到的蛋白质 [11],这个方案是可行、有效的。它不需要使用自动酶切仪(digestion robot) 。使用多通道移液枪和微孔板格式, 一天可以处理 96 个样品。标准的方法不需要对蛋白质进行还原和烷基化反应。这两个反应步骤比较花时间,但是对大部分的蛋白质鉴定没有影响,即使使用 SDS-PAGE 和 BN-PAGE 得到的样品。但根据我们的实验,这两个反应步骤似乎是角蛋白污染的一个重要来源。然而,在富含半胱氨 酸的情况下,蛋白质的还原和烷基化可能会增加蛋白质的覆盖率(见注释 1)。多通道的移液枪......阅读全文

利用纳升级液相色谱- 串联质谱进行蛋白质鉴定实验

实验材料:修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒:消化缓冲液                                                                  萃取液                                                          

利用纳升级液相色谱 - 串联质谱进行蛋白质鉴定实验

实验材料 修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒 消化缓冲液萃取液清洗液脱色液仪器、耗材 多通道移液枪Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管实验步骤 3.1 胶内蛋白的水解和多肽的提取(一天的实验方案)对于从 SDS-PAGE,2D-PAGE,BN-PAGE 电泳(经考马斯亮蓝

利用纳升级液相色谱- 串联质谱进行蛋白质鉴定实验

实验材料修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒消化缓冲液萃取液清洗液脱色液仪器、耗材多通道移液枪Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管实验步骤3.1 胶内蛋白的水解和多肽的提取(一天的实验方案)对于从 SDS-PAGE,2D-PAGE,BN-PAGE 电泳(经考马斯亮蓝 G-250

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联质谱实验

实验材料反相装填材料试剂、试剂盒缓冲液HPLC 级乙腈HPLC 级甲醇氯化钙溶液碳酸氢铵溶液仪器、耗材离子讲串联质谱仪实验步骤3.1 叶片和根组织的取材以及蛋白质沉淀( 1 ) 从植物的中部切取未衰老的绿色叶片,立即放入自封塑料袋中冷冻。如果没有冷冻设备,可先放在冰上,然后再放到 -20°C 保存。

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联质谱实验

实验材料:反相装填材料      试剂、试剂盒:缓冲液                                                                  HPLC 级乙腈                                                

什么是液相色谱串联质谱平台

高效液相色谱-质谱联用技术是以液相色谱作为分离系统,质谱作为检测系统,经纯化后的样品在液相色谱和质谱部分经过分离和离子化,经由检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势的互补,结合了色谱对复杂样品的高分离能力和质谱的高选择性,高灵敏度及能够提供相对分子量和结构信息的优点,在临床检验、临床研究领域

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联...(二)

3.5 二维纳升级高效液相色谱分离肽段柱切换分离是一种在线分离方法,通过 HPLC 缓冲液连续洗脱双相柱,使洗脱液进入质谱仪,以确保在上样、盐洗脱和冲洗柱的过程中不丢失样品。第一相根据电荷性质分离肽段,第二相是根据疏水特性分离肽段。( 1 ) 将 10 μl 样品注入 10 μl 自动进样环中,完成

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联...(一)

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联质谱实验实验材料 反相装填材料试剂、试剂盒 缓冲液HPLC 级乙腈HPLC 级甲醇氯化钙溶液碳酸氢铵溶液仪器、耗材 离子讲串联质谱仪实验步骤 3.1 叶片和根组织的取材以及蛋白质沉淀( 1 ) 从植物的中部切取未衰老的绿色叶片,立即放入自封塑料袋中冷冻。如果

高效液相色谱串联质谱和高效液相色谱质谱法的区别

两个的区别是质谱部分不同,串联质谱的质谱部分是多级的,而后者是一级的。

高效液相色谱串联质谱和高效液相色谱质谱法的区别

两个的区别是质谱部分不同,串联质谱的质谱部分是多级的,而后者是一级的。