免疫球蛋白G(IgG)片段的水解
一个新的抗体需要片段化的时候往往要进行摸索性的试验。选择反应时间的时候宁可保留部分抗体不被完全降解，这样可以避免蛋白酶过分裂解后导致抗体结合位点的破坏 。实验步骤木 瓜 蛋 白 酶 水 解 IgG 成 Fab 片段摸索性试验此 法 适 用 于 小 鼠（任何亚类）、大鼠、人 、山羊、绵羊、马 、鸡 、豚 鼠 和 牛 的 IgG水解。材 料保存于 PBS (附录 1 ) 中 的 2 mg/ml 纯 化 的 IgG (单 元 1.5)木 瓜 蛋 白 酶（2 X 结晶悬液； Sigma)水解缓冲液：0.02mol/LEDTA (二 钠 盐 ）/0.02mol/L 半胱氨酸/PBS (新鲜配制 ，冰上保存< l0h)溶 于 PBS 的 0.3mol/L 碘 乙 酰 胺（从结晶体新鲜配制； Sigma)PBS自制的微量透析槽或微量透析盒（如 Slide-A-Iyzer 透析盒； Pierce)1.将 IOOud 2 mg/m l 纯化......阅读全文
免－疫－球－蛋－白－G－(IgG)－片－段－的－水－解
一个新的抗体需要片段化的时候往往要进行摸索性的试验。选择反应时间的时候宁可保留部分抗体不被完全降解，这样可以避免蛋白酶过分裂解后导致抗体结合位点的破坏 。实验步骤木 瓜 蛋 白 酶 水 解 IgG 成 Fab 片段摸索性试验此 法 适 用 于 小 鼠（任何亚类）、大鼠、人 、山羊、绵羊、马 、鸡 、
免－疫－球－蛋－白－M(IgM)和－免－疫－球－蛋－白－D(IgD)－的纯化
实验步骤基 本 方 案 1 用透析和凝胶过滤层析法纯化 IgM此 法 纯 化 的 IgM 可达到较好纯度，可用于酶解、异 硫 氰 酸 盐 荧 光 素（FITC) 标记 、生物素标记或放射性标记。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)腹 水 或 单 克 隆 抗 体（MAb) 上 清（单 元 1.4)
免－疫－球－蛋－白－M(IgM)和－免－疫－球－蛋－白－D(IgD)－的纯化实验
实验步骤备 选 方 案 1 硫 酸 铵 沉 淀 法 纯 化 IgM此法适用于多数 IgM 抗体，尤其是一些在水中不能形成沉淀的 IgM 抗体。附 加 材 料（其 他 材 料 见 基 本 方 案 1 )饱和硫酸铵（SAS)硫酸铵结晶（CAS)硼酸缓冲液，可选备 选 方 案 2 甘 露 聚 糖 结 合
免－疫－球－蛋－白－融－合－蛋－白－的－构－建
实验步骤 基 本 方 案 1 免疫球蛋白融合蛋白的构建材 料编码靶基因的 D N A展开
免－疫－复－合－物－方－法－检－测－酪－氨－酸－蛋－白－激－酶
实验步骤基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液（新鲜配置并于冰上保存
蛋白质分离和分析——免－疫－印－迹－和－免－疫－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 液体容器中的蛋白质印迹材 料待分析样品标准分子质量蛋白质，预 染 型（Sigma 或 Bio-Rad) 或 生 物 素 化 型（Vector labs 或Sigma)转移缓冲液无粉手套Scotch-Brite 垫 片（3M ) 或类似海绵Whatman 3M M 滤纸或类
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验（三）
2.2 糖基化糖 基 化 是 一 种 常 见 的 P T M , 并 且 已 经 证 明 能 够 影 响 酶 的 活 性 、蛋 白 质 定 位 、稳 定 性 、信 号 转 导 、细 胞 黏 附 和 蛋 白 质 相 互 作 用 (Spiro, 2002k 目 前 已 经 发 现 在 肿 瘤 恶
抗－体－可－变－区－（－V－区）的克隆、表达和修饰
基于 PCR 的克隆方案利用了可变区中框架区和先导区的保守序列，尽管用框架区中的保守序列可合成引物，用于克隆可变区，但会引起框架区中氨基酸的改变，从而影响抗原结合。因此，用保守的疏水先导序列合成引物是比较好的方案。实验步骤基本方案 1 通 过 使 用 冗 余 引 物 克 隆 和 表 达 免 疫 球
酶－联－免－疫－吸－附－实－验2
十 字 交 叉 连 续 稀 释 分 析 法 （criss-cross serial-dilution analysis) 测定试剂最适浓度实验步骤展开
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验2
二、用 于 鉴 定 P T M 的富 集 技 术2.1 磷酸化丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的可逆磷酸化也许是研究最为深人的 PT M 。蛋白质磷酸化信号网络介导细胞对与不同的应激因子、生长因子、细胞因子以及细胞间相互作用作出响应。憐酸化还影响多种细胞进程，如增殖、凋亡 、迁移 、转录和蛋白质翻译（W
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验3
三、蛋白质的硝化修饰 酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸侧链的硝化与亚硝化作用构成了蛋白质硝化PT M 的主要部分。这些加成反应由发育、氧化应激及衰老过程中产生的活性氮介导。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的过度反应或调控紊乱造成的（Yeo et al.，2008)。活性氮和活性氧能够靶向于DN
蛋白质分离和分析——免－疫－亲－和－层－析
详细阐述利用亲和层析分离蛋白质的过程，进行蛋白质分析时，需将此规模缩小至微量离心管中进行免疫沉淀过程，对于单一的蛋白质或由相同亚基组成的蛋白质，经单向凝胶电泳后检测到单一的 蛋 白 质 条 带对荧光染色法进行了阐述，它主要用于磷蛋白和糖蛋白的检测。为了确定蛋白质是否是特异性抗原，可采用相对应的抗体进
Western－Blot的过程与优化，着重于化学发光检测（三）
四、化学发光信号4.1 信号捕捉虽然化学发光蛋白质印迹法十分常用，但是对于难于捕获的信号的捕捉却很棘手。蛋白质印迹法要用到一系列需要技巧的技术，因此许多因素都会导致无法捕捉到信号。由于变量较多 (表 33. 2)，问题印迹的问题诊断和排除就如同大海捞针一样困难。传统的方案在检测某一个蛋白质时通常
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验 实验步骤 一、引言 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 (P T
免疫复合物方法检测酪氨酸蛋白激酶
基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液（新鲜配置并于冰上保存）含蛋白
白球比例偏低什么原因
1、白蛋白降低、球蛋白不变。常见的引起白蛋白偏低的原因主要有营养不良、白蛋白是由肝脏合成的，假如有肝病的话，就会使白蛋白的合成减少，另外还有可能就是有肾源性低蛋白血症，也会使白球比例偏低。 2、白蛋白不变、球蛋白的值升高。当患有肾脏疾病或自身免疫性肝炎以及类风湿性关节炎时，会使球蛋白升高，从而
Western－Blot的过程与优化，着重于化学发光检测2
四、化学发光信号4.1 信号捕捉虽然化学发光蛋白质印迹法十分常用，但是对于难于捕获的信号的捕捉却很棘手。蛋白质印迹法要用到一系列需要技巧的技术，因此许多因素都会导致无法捕捉到信号。由于变量较多 (表 33. 2)，问题印迹的问题诊断和排除就如同大海捞针一样困难。传统的方案在检测某一个蛋白质时通常都是
Ni3Se4@NiFe水滑石纳米片的制备及其全解水研究获进展
近期，中国科学院合肥物质科学研究院固体物理研究所研究员李越课题组在分级异质结构Ni3Se4@NiFe 水滑石纳米片（LDH）的制备及其全解水研究方面取得新进展，相关研究结果发表在Nanoscale Horizons (DOI:10.1039/x0xx00000x)上。 随着能源危机和环境问题的
白灵片的性状
本品为糖衣片，除去糖衣后显棕褐色；气微香，味微苦。
白灵片的成分
当归、黄芪、三七、红花、赤芍、牡丹皮、马齿笕、桃仁、防风、白芷、苍术。
小儿解感片的性状
本品为糖衣片，除去糖衣呈棕褐色；味苦。
白球比例偏低是什么原因
白蛋白是由肝实质性细胞合成的，肝脏受损时，白蛋白的合成、细胞内运输和释放会发生障碍，引起血清白蛋白减少。球蛋白是由机体免疫器官制造的，当体内有病毒入侵时，就会产生大量的球蛋白，消灭病毒。 白球比例偏高的原因是什么？白球比偏高可能是由白蛋白增多、球蛋白减少或者是两者都有变化，只是其中一者的变化幅
重大新进！Sicence：肾癌驱动的一种新蛋展白
在一项新的研究中，来自中国同济大学、复旦大学、美国北卡罗来纳大学、哈佛医学院、德克萨斯大学MD安德森癌症中心、范德堡大学医学中心、新加坡基因组研究所、新加坡细胞与分子生物学研究所、新加坡国立癌症中心和杜克-新加坡国立大学医学院的研究人员发现了一种针对具有一种相同遗传变异的肾癌的潜在治疗靶点。科学
Western－Blot的过程与优化，着重于化学发光检测
实验步骤 一、蛋白质印迹法 蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯
T－C－R－库－的－抗－原－谱－/－免－疫－扫－描－技－术－分－析
实验步骤基 本 方 案 1 人 和 小 鼠TCR受体库多样性的免疫扫描技术分析材 料展
干细胞的鉴定实验——免－疫－电－镜－胶－体－金－标－记－技－术
实验步骤免 疫 电 镜 胶 体 金 标 记 技 术免疫电镜技术是利用抗原抗体特异性结合的原理，在细胞超微结构水平上定位、定性和定量，原位显示抗原大分子的技术。 1971 年 Faulk 等将胶体金标记抗体技术应用到电镜中，开始了免疫电镜胶体金标记技术。该技术的优点是：胶体金颗粒致密，易于辨认 ；定位
白灵片的用法用量
口服，一次4片，一日3次；同时使用外搽白灵酊涂患处，一日3次。三个月为一个疗程。
小儿解感片的用法用量
口服，1至3岁小儿，一次 1片，4至6岁，一次2片，9至14岁，一次3片，或遵医嘱。
雅解片的注意事项
1．饮食宜清淡，忌烟、酒及辛辣、生冷、油腻食物。 2．不宜在服药期间同时服用滋补性中药。 3．有高血压、心脏病、肝病、糖尿病、肾病等慢性病严重者应在医师指导下服用。 4．服药3～7天症状无缓解，应去医院就诊。 5．儿童、年老体弱者应在医师指导下服用。 6．对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。 7．
免水凯氏定氮仪维护保养教程
凯氏定氮仪的分析原理-凯氏定氮法测定试样时，需经过消解、蒸馏、滴定3个过程样品的消解就是将含氮的有机化合物与硫酸和催化剂一同加热消化，使有机氮分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸按样品经过消解后将试样中有机氮转化为无机氮，再将消解后的样品加入到定氮仪蒸馏器中进行碱解蒸馏。