如何消除引物二聚体？
重新设计引物，这是解决该问题最根本的办法增加模板用量减小引物浓度引物长度适中提高退火温度减少循环次数可以适当的在 Mix 中添加少量的甘油或 DMSO......阅读全文
如何消除引物二聚体？
重新设计引物，这是解决该问题最根本的办法增加模板用量减小引物浓度引物长度适中提高退火温度减少循环次数可以适当的在 Mix 中添加少量的甘油或 DMSO
怎样消除引物二聚体
首先在设计引物的时候,要注意避免产生引物二聚体.现在的引物设计软件都会有一个dimer的选项,可以看出你设计的引物是否会发生二聚体.如果会形成二聚体,并且序列不能有大的变动,那就注意一下在3'端别发生dimer的互补.其次,在PCR时提高退火温度可以提高PCR的特异性,可以减少引物二聚体.
引物二聚体的形成于消除
什么是引物二聚体?怎样消除引物二聚体?引物二聚体是引物的3'端间相互错配扩增形成的。引物二聚体的出现是必然的，只是或多或少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我们 的肉眼看不到而已。提高PCR 严谨性(包括提高退火温度 ，降低引物浓度等)可大大降低二聚体的浓度。
引物二聚体是如何形成的？
最根本的原因是引物之间或者引物自身 3’ 端部分碱基互补结合模板量过低引物浓度过大引物长度过短退火温度低循环次数过高
如何区分引物二聚体和目的条带？
因为引物二聚体的大小从几十 bp 至几百 bp 不等，所以当你的目的条带的分子量比较小的时候，电泳后所看到的结果不一定是目的条带，很有可能是引物二聚体，所以我们需要一个有效的方法来区分二者。当我们对引物二聚体形成的本质了解了之后，想要区分二者其实并不难，我相信大家看到这里的时候已经知道了引物二聚体形
PCR－实用技巧：七大方法消除引物二聚体
相信很多人一听到引物二聚体的时候都会很愤怒，因为几乎我们每个人都受到过它的折磨。它作为 PCR 的副产物，甚至有时候是主要产物充斥着我们的整个 PCR 实验过程。你在被它折磨的不行不行的时候，你有想过它为什么总是出现在你的实验结果中吗接下来就让我带大家走进它的世界，了解它，认识它，最后战胜它。一、引
PCR－实用技巧：七大方法消除引物二聚体
相信很多人一听到引物二聚体的时候都会很愤怒，因为几乎我们每个人都受到过它的折磨。它作为 PCR 的副产物，甚至有时候是主要产物充斥着我们的整个 PCR 实验过程。你在被它折磨的不行不行的时候，你有想过它为什么总是出现在你的实验结果中吗接下来就让我带大家走进它的世界，了解它，认识它，最后战胜它。引物二
如何判断两个引物是否形成二聚体
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板
什么是引物二聚体
1、引物二聚体是引物的3端间相互错配扩增形成的。2、引物二聚体的出现是必然的，只是或多或少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我们 的肉眼看不到而已。提高PCR严谨性(包括提高退火温度，降低引物浓度等)可大大降低二聚体的浓度。
什么是引物二聚体
1、引物二聚体是引物的3端间相互错配扩增形成的。2、引物二聚体的出现是必然的，只是或多或少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我们 的肉眼看不到而已。提高PCR严谨性(包括提高退火温度，降低引物浓度等)可大大降低二聚体的浓度。
如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值
最近在做qPCR，今天遇到个样品的浓度很低，想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线，于是照常做了。结果最后的溶解曲线发现，头三个的Tm是84，之后的5个样品时77。从Ct值来看，也是头三个还有点像样，后面的Ct都是33-34.很显然后面的5个应该不是扩增产物，应该是奈不住寂寞的引物二聚体之类的非目
怎么鉴别引物二聚体和产物
怎么鉴别引物二聚体和产物这个不好说:一般引物二聚体小于150BP.条带模糊、条带宽、跑的比较快在溴酚蓝前面.你可以跑胶过程总观察一下。如果不是可能为非特异性扩增。您片段要是比较短建议您克隆后测序效果比较好.
怎么鉴别引物二聚体和产物
PCR可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后，我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析，也可以通过对光密度扫描来进半定量的分析。无论定性还是半定量分析，分析的都是PCR终产物。但是在许多情况下，我们所感兴趣的是未经PCR信号放大之前的起始模板量。例如我们想知道某一特定基因在
怎么鉴别引物二聚体和产物
这个不好说:一般引物二聚体小于150BP.条带模糊、条带宽、跑的比较快在溴酚蓝前面.你可以跑胶过程总观察一下。如果不是可能为非特异性扩增。您片段要是比较短建议您克隆后测序效果比较好.
PCR的引物二聚体怎么判断
这个不好说：一般引物二聚体小于150BP.条带模糊、条带宽、跑的比较快在溴酚蓝前面.你可以跑胶过程总观察一下。如果不是可能为非特异性扩增。您片段要是比较短建议您克隆后测序效果比较好.
如何溶解引物？
干燥后的引物质地非常疏松，开盖前最好离心一下，或管垂直向上在桌面上敲敲，将引物粉末收集到管底。根据计算出的体积加入去离子无菌水或10mM Tris pH7.5缓冲液，室温放置几分钟，振荡助溶，离心将溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸馏水，因为有些蒸馏水的pH值比较低（pH4-5）,引物在这种
如何保存引物？
引物合成后，经过一系列处理和纯化步骤，旋转干燥而成无色或白色絮状干粉。干 粉：运输时常温运输，-20℃可以保存一年。储存液：配好后分装成几管，避免反复冻融，-20℃可以保存半年。工作液：常规使用，4℃保存，也可-20℃保存，但应避免反复冻融。修饰荧光引物：需要避光保存，尽快使用为宜。
引物如何保存？
拿到手的引物一般已分装为两管。我们建议先溶解其中一管用于实验，另一管干粉保存备用，以备不时之需。干粉状态的引物非常稳定。-20℃可保存2年以上。常见的做法是将引物溶解至10倍的存储度，-20℃长期保存。使用时取出稀释至1倍的工作液。工作液保存于4℃即可。在4℃下引物溶液是比较稳定的，保存一周以上仍可
减少pcr产物中引物二聚体的方法
减少引物二聚体的方法1. 从引物自身着手，重新设计引物，这是最根本解决这一问题的办法；2. 可能模板有问题；3. 模板浓度过小，适当加大模板量；4. Taq酶，引物，Mg2+浓度可能过高，可降低它们的浓度；5. 取你所要加的上下游引物混合后，在100摄氏度下的沸水中煮5分钟，然后迅速拿出至于冰块之上
减少PCR产物中引物二聚体的方法
PCR反应过程中产生引物二聚体是做PCR的各位战友经常遇到的问题,下面介绍一些减少引物二聚体的方法：1.从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法；2.可能模板有问题；3.模板浓度过小,适当加大模板量；4.Taq酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可降低它们的浓度；5.取你所要加的上下游
减少PCR产物中引物二聚体的方法
1.从引物自身着手，重新设计引物，这是最根本解决这一问题的办法。2.可能模板有问题，模板浓度过小，适当加大模板量。3.Taq酶，引物，Mg2+浓度可能过高，可降低它们的浓度。4.将上下引物混合后，在100℃的沸水中煮5分钟，然后迅速拿出至于冰块之上瞬时冷却，这时再加入反应体系当中，引物二聚体就会消失
算法辅助的超多重PCR引物设计实现超低的引物二聚体水平
近日，专注于核酸分子杂交底层技术研发和应用转化的创新型分子诊断公司阅尔基因与同济大学附属上海肺科医院任胜祥教授合作在Nature Communications再次发表重磅研究，介绍了一种多重PCR引物设计的核心算法SADDLE，在大型扩增子法测序panel中首次实现了超低的引物二聚体水平。SADDL
pcr－扩增产生大量引物二聚体的原因
引物设计不合理，两条或一条引物的3`端有互补序列，造成自己配对延伸而扩增。建议重新设计引物，，或者降低退火温度、增加模板和引物的量试下，，不过能不能扩出来看运气了。
pcr扩增产生大量引物二聚体的原因
引物设计不合理，两条或一条引物的3`端有互补序列，造成自己配对延伸而扩增。建议重新设计引物，，或者降低退火温度、增加模板和引物的量试下，，不过能不能扩出来看运气了。
TSQ如何消除干扰？
帖子：TSQ如何消除干扰？
如何消除前沿峰？
你检测的是什么物质？可以考虑以下的情况：样品的溶剂不适合。溶剂的洗脱力比流动相大。这时可以考虑更换样品溶剂或流动相，种类和比例要自己摸索了。也可能是柱超载，未被保留的样品在正常出峰时间前陆续出来，形成前沿峰。又或者是前沿峰的前半部分包含了小峰未被分开，形成前沿峰，这就要考察你的色谱条件了。
如何消除乳化现象？
在使用分液漏斗进行萃取、洗涤操作时，尤其是用碱溶液洗涤有机物，剧烈振荡后，往往会由于发生乳化现象不分层，而难以分离。如果乳化程度不严重，可将分液漏斗在水平方向上缓慢地旋转摇动后静置片刻，即可消除界面处的泡沫状，促进分层。若仍不分层，可补加适量水后，再水平旋转摇动或放置过夜，便可分出清晰的界面。如果溶
如何设计引物（一）
Primers:i) Oligonucleotide primers are generally supplied as "so many OD units/ml" - but what does this mean, in terms of mg/ml, or mmol/ml, etc?Given
如何设计引物（二）
Nucleotides:Stocks of nucleotides for PCR (or other procedure) are NEARLY ALWAYS dNTPs (deoxynucleotides), and concentrations is almost always given i
PCR只有引物二聚体的条带，没有目的基因条带
如果实验目的只是基因型鉴定，对PCR产物无其他要求的话，二聚体并非不能忍受，可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性，即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度，琼脂糖电泳检测是否有目标条带，即使可能并不清晰；3.选取最清晰的温度，在PCR体系中设置镁离子浓度梯度，选取最理想的条件