谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
实验材料 表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液TritonX-100DNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 SorvallSS-34 转头或相当的转头谷胱甘肽-琼脂糖树脂皮下注射针头实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录 1。贮存液稀释至适当浓度。二硫苏糖醇（1mol/L)谷胱甘肽洗脱缓冲液10mmol/L 还原型谷胱甘肽50 mmol/LTris-Cl(pH8.0)磷酸缓冲钠盐溶液（PBS)(4°C)TritonX-100(0.2%V/V)酶和缓冲液DNase(5 mg/ml)溶菌酶RNase(5 mg/ml)凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液溶液的配制和贮存参照生产商手册。凝胶SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10%)用于分离蛋白的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备请参考附录 8。离心机和转头SorvallSS......阅读全文
谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
实验材料 表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞 试剂、试剂盒 二硫苏糖醇 谷胱甘肽洗脱缓冲液 磷酸
谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
pGEX 载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽 S 转移酶融合，因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液Tri
谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
实验材料 表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液TritonX-100DNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 SorvallSS-34 转头或相当的转头谷胱甘肽-琼脂糖树脂皮下注射针头实验步骤
谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的表达及纯化实验
实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒 氨苄青霉素LBPBSSDS甘油谷胱甘肽 仪器、耗材 离心机摇床转子超声波发生器 实验步骤 1. 按正确读框将DNA片段亚克隆入合适的pGEX载体中，转化大肠杆菌感受态细胞， 在LB/氨苄青霉素平皿上筛选转化子，以不插
谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的表达及纯化实验
基本方案 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的表达及纯化实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 氨苄青霉素LBPBSSDS甘油谷胱甘肽仪器、耗材 离心机摇床转子超声波发生器实验步骤 1. 按正确读框将DNA片段亚克隆入合适的pGEX载体中，转化大肠杆菌感受态细胞， 在LB/氨苄青霉素平皿上筛选转化子，以不插入外源DNA的自连载体作对照，平皿置37℃孵育12~1
直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验
实验材料 表达 BMP 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液细胞洗涤缓冲液柱洗脱缓冲液柱洗涤缓冲液MgCl2PMSFSDS 凝胶加样缓冲液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Beckman Ti60 转头或相当的转头
直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验
亲和层析方法几乎可以将麦芽糖结合融合蛋白纯化成单组分。麦芽糖结合蛋自（MBP) 是一个由大肠杆菌 malE 基因编码的周质蛋白，是细菌麦芽糖转运系统的成员之一。MBP 能结合微摩尔水平的麦芽糖和麦芽糊精，因此可用交联了麦芽糖的琼脂糖进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J
谷胱甘肽琼脂糖凝胶的使用方法
实验概要本实验介绍了谷胱甘肽琼脂糖凝胶的使用方法。Pgex载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽S-转移酶溶合，因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。Pgex是一类以谷胱甘肽(γ-谷胱甘肽半胱胺酰甘氨酸)作为底物，通过形成硫醇尿酸失活毒性小分子的酶。由于GST对底物的亲和力是亚豪摩尔级的，因此谷胱甘肽
金属螯合亲和层析实验——MCAC纯化带组氨酸尾可溶融合蛋白
经遗传工程改造的使其氨基端或羧基端带上6个连续的组氨酸残基的重组蛋白，可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸（NTA）使镍离子固相化的层析介质加以提纯，是为金属螯合亲和层析。实验材料蛋白质试剂、试剂盒IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材层析柱转子实验步骤1. 接种含以