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丹磺酰化法分析蛋白质N末端氨基酸实验

丹磺酰化法 实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间形成氢键, 这种氢键的强弱决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离物在聚酰胺表面发生吸附、解吸附、再吸附和再解吸附的连续过程, 就能导致分离物达到分离的目的。 实验材料 ......阅读全文

丹磺酰化法分析蛋白质 N-末端氨基酸实验

实验方法原理蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间

丹磺酰化法分析蛋白质 N-末端氨基酸实验

丹磺酰化法             实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰

丹磺酰化法分析蛋白质 N-末端氨基酸实验

实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被

磺基水杨酸光度法

方法提要在pH8~11的氨性溶液中,铁(Ⅲ)与磺基水杨酸生成稳定的黄色配合物,在波长425nm处有最大吸收,颜色深度与含铁量呈正比,借以光度测定铁。方法适用于海洋沉积物、水系沉积物中三氧化二铁的测定。测定范围:w(Fe2O3)为0.5%~15%。仪器分光光度计。试剂盐酸。氢氧化铵。磺基水杨酸溶液(2

酰化试剂(Bolton和Hunter试剂)法

1.原理 用酰化剂3--(4-羟苯基)丙酸—N琥珀酰胺酯(Bolton—Hunter试剂)做连接试剂,将125I标记在羟苯基的2,5位置上,再将琥珀酰胺酯水解,通过一个酰氨键将3--(4—羟基—5—125I—苯基)接在蛋白或多肽的末端氨基上。  2.方法 125I—Bolton—Hunter试剂可用

蛋白质乙酰化修饰的精细调控

近期,国际著名学术期刊《美国国家科学院院刊》在线发表了中国科学技术大学生命科学学院施蕴渝教授与姚雪彪教授研究组的合作成果,文章标题为EB1 acetylation by P300/CBP-associated factor (PCAF) ensures accurate kinetochore -m

磺基水杨酸法尿蛋白定性

  磺基水杨酸法:又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快,与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应;敏感度达0.05g/L,因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法,并推荐为检查尿蛋白的确证试验。  根据反应的混浊程度,作出尿蛋白的定性或半定量判断:  阴性(-

蛋白质一级结构的测定方法(二)

   2)末端分析 其方法较多,这里我们只介绍较常用的几种。  (1)N-末端测定  A.二硝基氟苯法(FDNB,DNFB):1945年Sanger提出此方法,是他的重要贡献之一。  DNP-氨基酸用有机溶剂抽提后,通过层析位置可鉴定它是何种氨基酸。Sanger用此方法测定了胰岛素的N末端分别为甘

磺基水杨酸法检测尿蛋白实验

实验方法原理磺基水杨酸为生物碱试剂,在酸性磺酸根离子上蛋白质氨基的阳离于结合成不溶性蛋白盐沉淀试剂、试剂盒磺基水杨酸水溶液实验步骤实验试剂:1、磺基水杨酸水溶液,磺基本杨酸20g,加水补至100ml实验方法:取试管1只加入澄清尿液2-3ml滴加磺基水杨酸试剂0.1ml立即轻轻摇匀1分钟内观察结果.实

磺基水杨酸法检测尿蛋白实验

实验方法原理 磺基水杨酸为生物碱试剂,在酸性磺酸根离子上蛋白质氨基的阳离于结合成不溶性蛋白盐沉淀试剂、试剂盒 磺基水杨酸水溶液实验步骤 实验试剂:1、磺基水杨酸水溶液,磺基本杨酸20g,加水补至100ml实验方法:取试管1只加入澄清尿液2-3ml滴加磺基水杨酸试剂0.1ml立即轻轻摇匀1分钟内观察结