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疫共沉淀详细步骤

实验概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。本实验详细介绍了免疫共沉淀的详细步骤及注意事项。实验原理当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。其优点为:(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相......阅读全文

疫共沉淀详细步骤

实验概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。本实验详细介绍了免疫共沉淀的详细步骤及注意事项。实验原理当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋

免疫共沉淀

实验概要本实验以植物叶片为试材介绍了免疫共沉淀的基本方法。主要试剂50uM雌激素,液氮,提取缓冲液TBS(50mM Tris-Cl,0.15M NaCl,pH 7.4,1mM PMSF,5mM Benzamidine),glycine-HCl,TBS,洗脱缓冲液(TBS,0.5mg/mL 3

什么是共沉淀?

共沉淀(coprecipitation),一种沉淀从溶液中析出时,引起某些共存的可溶性物质一起沉淀的现象。共沉淀是重量分析法误差的主要来源之一,主要原因有表面吸附,混晶,包埋等。

免疫共沉淀 简介

蛋白质间相互作用研究方法:免疫共沉淀1.用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2.将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3.收集上清(约30 ml)并加入30μg的适当抗体,4℃摇动免疫沉

免疫共沉淀技术

免疫沉淀可用于定位甲基化或转录因子结合的位置等DNA变化,但可能需要与假抗体进行斗争。尽管ChIP-seq、DIP-seq和相关技术可以提供全基因组测定的相关信息,但它们并非总是有效。染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)或DNA免疫沉淀(DNA

免疫共沉淀概述

实验概要本实验以植物叶片为试材介绍了免疫共沉淀的基本方法。主要试剂50uM雌激素,液氮,提取缓冲液TBS(50mM Tris-Cl,0.15M NaCl,pH 7.4,1mM PMSF,5mM Benzamidine),glycine-HCl,TBS,洗脱缓冲液(TBS,0.5mg/mL 3

助力战“疫” 滴露抗疫医基金成立

  近日,由国家卫生健康委员会、中国友好和平发展基金会联合利洁时集团旗下滴露品牌共同成立了“滴露抗疫医基金”。该基金旨在对疫情防控过程中做出突出贡献的医护人员进行专项奖励。  截止2月18日,国家卫生健康委员会已经派出3.2万余名医务人员驰援湖北武汉。在这场战“疫”中,医务人员做出了巨大的努力与牺牲

助力硬核抗疫 为科技战疫贡献高校力量

   新冠疫情是一场大考,考验着我国高校抗击疫情科研攻关实力。疫情发生以来,华中科技大学充分发挥科研优势和多学科综合交叉优势,积极开展科研攻关,尽最大努力为打赢疫情阻击战提供科技支撑。  在教育部、科技部等部门的部署下,我校第一时间组织30家科研机构和医院,组建24支重点科研团队,投入5000万元科

免疫共沉淀技术路线

准备工作: 预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机 1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS; 2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2

共沉淀的应用范围

共沉淀分离法是富集痕量组分的有效方法之一,是利用溶液中主沉淀物(称为载体)析出时将共存的某些微量组分载带下来而得到分离的方法。例如,在痕量存在下将硫酸钡沉淀时,几乎可载带下来所有的;当氯化银沉淀时,可将溶液中极微量的金收集起来,予以富集。 共沉淀分离富集—火焰原子吸收光谱法测定痕量金属元素的研究 ,