细胞冻存技术介绍
细胞冻存技术 实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。 检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置温度计;2、超低温冰箱放置加热器、大量样品或反复开门 1. 冻存保护剂 很多化合物都可以作为冻存保护剂,它们既可以单独使用也可以联合使用,例如糖、血清和去污剂。虽然冻存没有绝对的准则,但是大家普遍认为二甲基亚砜(DMSO)和甘油是保护活细胞和组织使用最广泛且最有效的冻存保护剂。其他冻存保护剂可根据情况使用,可单独使用也可联合使用,包括:聚乙烯乙二醇(polyethylene glycol),丙烯乙二醇(propylene glycol),甘油(glycerine),聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidon......阅读全文
细胞冻存技术介绍
细胞冻存技术实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置温度计;2、超低温冰
细胞冻存技术介绍
细胞冻存技术 实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。 检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置
原代细胞冻存技术
1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟,弃上清液。4、沉淀加含DMSO的培养液,计数,调整至(1-10)×106/ml。5、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。6、密封冻
原代细胞冻存技术
1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟,弃上清液。4、沉淀加含DMSO的培养液,计数,调整至(1-10)×106 /ml。5、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。6、密封冻
细胞培养|细胞冻存技术原理
1. 细胞冻存是将细胞储存在低温环境中,减少细胞代谢,实现长期储存的一种技术。2. 在大多数细胞系中,细胞会随着衰老和演化不断的积累改变,造成表型和基因型的“培养漂移”,在冻存过程中,适当的操作和合适的冻存条件可以减少细胞特性的改变或丢失,起到细胞保种的作用。因而,正确且成功的冻存对于细胞的长久应用
如何冻存细胞
一、材料 (一)仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱(4℃、-20℃、-70℃) 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 (二)玻璃器皿 1.吸管(弯头、直头) 2.培养瓶 3.玻璃瓶(250ml、100ml) 4.废液缸 (三)塑料器皿 1
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷
如何冻存细胞
一、材料 (一)仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱(4℃、-20℃、-70℃) 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 (二)玻璃器皿 1.吸管(弯头、直头) 2.培养瓶 3.玻璃瓶(250ml、100ml) 4.废液缸 (三)塑料器皿 1
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷
细胞冻存实验
实验方法原理细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷冻(图 20.8)。细胞用胰酶消化后,加入含有细胞保护剂的培养基,分装至冻存管中,然后将其夹到铝条上,用纸质管包裹,放入隔热储存管中。将储存管及其内容物于-70℃或-80℃存放4h或过夜,最后将含有