维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法，具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一．准备及预实验 确定细胞系相关信息，需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况 注：为避免慢病毒感染后细胞死亡，务必保证细胞无支原体污染！ 预实验确定MOI值 查阅文献确定慢病毒在目标细胞系中的MOI； 参考查阅得到的数据，设计梯度实验，摸索最适MOI。 预实验确定筛选药物用量： 查阅Puromycin/Blastincidin等在目标细胞系中稳转株筛选的致死用量信息； 参考查阅得到的数据，确定3个药物浓度梯度（如没有相关信息，则需将药物浓度梯度范围增大，数量增多至6个）； Day0将细胞铺于6孔板中，使Day1细胞融合度约90%； Day1按（2）中设置的药物梯度，加入药物； Day4换液，并......阅读全文
维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法，具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一．准备及预实验 确定细胞系相关信息，需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况
维真稳转株构建流程（二）
平板挑取法 计数100个多克隆稳转株细胞，接种于一个10cm培养盘中；注：尽量吹打均匀，防止细胞聚团。过夜培养后，观察并寻找单个细胞的位置，并在盘底做标记；培养培养2周；注：培养的第一周不要换液，接下来每3-4天换液。待标记处的细胞扩增为肉眼可见的白点，在移液器尖端吸取一点胰酶，缓慢滴至细胞处，待细
维真稳转株构建流程（一）
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法，具有高效整合、目标细胞广泛等特点。一．准备及预实验确定细胞系相关信息，需包括如下内容目标细胞系培养条件目标细胞增殖速度支原体污染情况注：为避免慢病毒感染后细胞死
知识分享：维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法，具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一．准备及预实验 确定细胞系相关信息，需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况
知识分享：维真腺病毒系统产品手册
产品说明书 本产品仅限用于研究，严禁用于疾病诊断。 本产品仅供购买方内部研究使用，未经维真生物公司书面许可，严禁转售。 产品有限责任担保 维真生物公司保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了维真生物公司更换产品的责任。维真生物公司不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用途的保证
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一．Cre-loxP重组系统作用原理 Cre重组酶和loxP位点 Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够特异性识别loxP位点。
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几天前，刘真转发了一条招聘博士后的通知。“我们的设备去年底到位，年后开始调试，实验室已经开始运转了。”刘真告诉科技日报记者。 全球首例体细胞克隆猴的成功，让刘真成为猕猴体细胞克隆技术的世界“冠军”，也成为中国科学院神经科学研究所（以下简称“神经所”）最年轻的课题组负责人。 2017年底，“中
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