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基于报告基因生物学活性探索方法

下面我们来看下具体的应用实例: ......阅读全文

方辰:努力探索未知领域

笔、纸和计算机,是中科院物理研究所研究员方辰办公桌上必不可少的3样东西。作为理论物理学家,他每天的主要工作就是用笔在纸上推导一些方程公式,偶尔用计算机辅助做一些运算。 在外人看来,这样的工作似乎很枯燥,但方辰却乐此不疲。在凝聚态物理理论研究领域耕耘10年,成绩亮眼 作为理论物理学家,方

为什么荧光素酶报告基因活性太低

为什么荧光素酶报告基因活性太低(1) 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。(2)设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。(3)筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。(4) 扩增转录因子质粒,提

TNF-α生物学活性检测方法——光密度法

TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移,被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低,各种酶外泄,引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-α的敏感性有很大的差异,用放线菌素D、丝裂酶素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞,可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。实验材料小鼠L929细胞

细胞高通量药物筛选平台,必用透析胎牛血清

高通量药物筛选是当今时髦的新药研发方法。一方面,有机化学的飞速发展使得小分子的化合物库种类越来越多,另一方面,分子生物学为靶蛋白的筛选提供了荧光报告技术。同时,以细胞学为基础分子生物学方法还可用于筛选出的化合物的生物活性检测。 高通量药物筛选作为药物筛选的一个快捷途径,可在三个平台上进行应用:分别为

方晓红:探索纳米生物世界的精彩

  “女性专家数量少并不能说明女性不适合做科研。女性科研工作者首先得相信自己,然后才能取得成功。”  说这话的,是方晓红。在2009年新中国成立60周年晚宴前,包括方晓红在内的海外归国人才受到了党和国家领导人的接见。当胡锦涛总书记与方晓红握手时,微笑着说了一句“女专家很少啊”,至今让方晓红

抗体的生物学活性

抗体的生物学功能:可以中和毒素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原的过程中起决定性作用;激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏。人的抗体IgG1~3和IgM与相应抗原结合后,可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露,

补体的生物学活性

  补体系统是人和某些动物种属,在长期的种系进化过程中获得的非特异性免疫因素之一,它也在特异性免疫中发挥效应,它的作用是多方面的。补体系统的生物学活性,大多是由补体系统激活时产生的各种活性物质(主要是裂解产物)发挥的。补体成分及其裂解产物的生物活性列于表3-6。补体成分或裂解产物生物活性作用机制C5

生物学活性测定方法

用于细胞因子生物学活性测定,对细胞因子前体或其降解产物与可溶性受体结合的细胞因子、细胞因子聚合物等,均不能用此法检测。细胞因子受体拮抗物、细胞因子的天然抗体和类细胞因子等,也将干扰细胞因子活性的测定。细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:①操作繁琐;②易受干扰;③敏感性较高;④特异性不高。

报告基因实验——GUS 活性的组织化学检测

实验材料组织试剂、试剂盒HGUS 缓冲液磷酸盐缓冲液乙醇溶液仪器、耗材微量滴定板或者试管实验步骤1. 将组织置于新配制的 HGUS 缓冲液中(含有 X-Gulc 及其他添加物),足以完全浸没材料,试验在微量滴定板或者试管中进行。2.  吸真空 5~10 min,然后去掉真空条件。3. 铝箔包裹,37