EMSA凝胶迁移(Electrophoreticmobilityshiftassay)实验

实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复......阅读全文

EMSA凝胶迁移-(Electrophoretic-mobility-shift-assay)实验

实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,

EMSA凝胶迁移-(Electrophoretic-mobility-shift-assay)

实验概要凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前

凝胶迁移滞后实验基本原理

凝胶迁移滞后实验(electrophoretic mobility shift assays,EMSA)是近年发展起来的研究核酸与蛋白质相互作用简单、快速、敏感的方法。目前已经成为转录因子研究的经典方法。其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的

电泳迁移率变动分析的定义

电泳迁移率变动分析,又称凝胶阻滞实验,英文名electrophoretic mobility shift assay,简称EMSA。是体外利用电泳迁移率的变化来分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。

电泳迁移率变动分析的简介

  用放射性同位素标记待检测的片段(即探针DNA),然后与细胞提取物共温育,形成DNA-蛋白复合物,将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。  电泳迁移率变动分析,又称凝胶阻滞实验,英文名electrophoretic mobility shift assay,简称EMSA。是体外利用电泳迁移

凝胶迁移实验(EMSA)——凝胶迁移

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)可以:(1)研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用;(2)可用于DNA定性和定量分析;(3)用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。实验方法原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初

EMSA实验原理示意图介绍

  EMSA全称是Electrophoretic Mobility Shift Assay,中文叫凝胶迁移实验或电泳迁移率实验,它是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术,可用于定性和定量分析。   这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE

EMSA实验原理

EMSA全称是Electrophoretic Mobility Shift Assay,中文叫凝胶迁移实验或电泳迁移率实验,它是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术,可用于定性和定量分析。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁

凝胶迁移实验(EMSA)

实验方法原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列

凝胶迁移实验(EMSA)

            实验方法原理 一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的D

凝胶迁移或电泳迁移率实验

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)可以:(1)研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用;(2)可用于DNA定性和定量分析;(3)用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。凝胶迁移或电泳迁移率实验凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobili

条带转移(Band-Shift)

Or gel mobility shift assay, gel shift assay, gel retardation, electrophoretic mobility shift assay (EMSA) EMSA Using Oligos (Mike A. Dyer)Anneal two

凝胶迁移实验(EMSA)之二:实验方法原理

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通

凝胶迁移实验(EMSA)之一

实验操作方法1.探针的标记:(1) 如下设置探针标记的反应体系:待标记探针 (1.75pmol/微升)                        2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X)             1微升Nuclease-Free Water

凝胶迁移实验(EMSA)实验方法

凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoretic mobility shift assay),是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验,也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白

EMSA凝胶迁移(一)

实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术zui初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保

EMSA凝胶迁移(二)

实验步骤生物素标记探针:1. 按如下顺序加入反应物,温和混匀,切勿涡漩    超纯水                                   25μl5×TdT Reaction Buffer           10μl探针(1μM)                          

凝胶迁移实验(EMSA)之三:实验步骤

实验材料:DNA样品试剂、试剂盒:    [γ-32P]ATP、T4多聚核苷酸激酶、Nuclease-Free Water、T4多聚核苷酸激酶缓冲液、醋酸铵、TE、无水乙醇、TBE buffer、重蒸水、甲叉双、丙烯酰胺、丙烯酰胺、甘油、过硫酸铵、TEMED(四甲基乙二胺)、EMSA Gel

电泳迁移率变动分析

中文名电泳迁移率变动分析外文名electrophoretic mobility shift assay定义用放射性同位素标记待检测的片段(即探针DNA),然后与细胞提取物共温育,形成DNA-蛋白复合物,将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。

凝胶迁移(Gel-Shift)实验操作方法2

探针冷竞争反应:Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 2微升未标记的探针 1微升标记好的探针 1微升总体积 10微升突变探针的冷竞争反应:Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shif

凝胶迁移(Gel-Shift)实验操作方法1

1.探针的标记:(1) 如下设置探针标记的反应体系:待标记探针 (1.75pmol/微升) 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X) 1微升Nuclease-Free Water 5微升[γ-32P]ATP(3,000Ci/mmol at 10mCi/ml)

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-)

实验概要凝胶迁移或电泳迁移率实验是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。通常将纯化的蛋白或细胞粗提液和标记的DNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物比非结合的探针移动得慢。标记的探针依研究的结合蛋白的不同,

电泳迁移实验-EMSA

1、核蛋白的提取①用 细 胞 刮子刮取RAW264.7细胞与VSMC,移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS洗两遍,于4℃, 5000g离心3min,沉淀细胞。③加5倍细胞体积的冰浴缓冲液A洗细胞一次,于4℃,5000g离心3 min沉淀细胞.④加3倍细胞体积的冰浴缓冲液A悬浮细胞,冰上放置

电泳迁移实验-EMSA

核蛋白的提取①用细胞刮子刮取RAW264.7 细胞与VSMC ,移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS 洗两遍,于4 ℃ , 5000g 离心3min ,沉淀细胞。③加5 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 洗细胞一次,于4 ℃ ,5000g 离心3 min 沉淀细胞. ④加3 倍细胞体积的冰

电泳迁移实验-EMSA

核蛋白的提取 ①用细胞刮子刮取RAW264.7 细胞与VSMC ,移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS 洗两遍,于4 ℃ , 5000g 离心3min ,沉淀细胞。③加5 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 洗细胞一次,于4 ℃ ,5000g 离心3 min 沉淀细胞. ④加3 倍细胞体积的冰

Gel-Shift-Assay-Systems

ProtocolsDownloadprotocol183kbpdf?Abstract for Gel Shift Assay SystemsThe gel shift, or electrophoretic mobility shift, assay provides a simple and ra

分子间相互作用分析:荧光标记VS无标记

同无标记技术相比,利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低,例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验,无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而,基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性,像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中,研究人员该如何选择合适的检测技术呢?不要着急,下

凝胶迁移实验(gel-shift)基本知识问题与回答1

(1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验?凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记

凝胶迁移实验(gel-shift)基本知识问题与回答3

TFIIB与预启动复合物结合后,致使RNA聚合酶II和TFIIF结合到转录启始区。故TFIIB在预启动复合物的形成中有重要作用。当用纯化的 TFIID作凝胶迁移实验时,poly dI-dC不用加入结合反应中。结合缓冲液含10%甘油,20mM Tris(pH8.0), 10mM MgCl2,