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1、核蛋白的提取①用 细 胞 刮子刮取RAW264.7细胞与VSMC，移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS洗两遍，于4℃, 5000g离心3min，沉淀细胞。③加5倍细胞体积的冰浴缓冲液A洗细胞一次，于4℃,5000g离心3 min沉淀细胞.④加3倍细胞体积的冰浴缓冲液A悬浮细胞，冰上放置30 min、剧烈振荡10次，4℃,5000g离心15min，去上清，沉淀为细胞核。⑤加与细胞等体积的冰浴缓冲液B，充分混匀，冰上放置30m in后，于40℃ ,15 000g离心15min,上清为核蛋白。⑥取2ul核蛋白Bradford法测定核蛋白浓度，分装后于-70℃保存。2.探针的标记与纯化A、 探 针 的标记:将以下试剂加入冰浴中的0.5m l的EP管中，总体积20时。①未标记的探针:2ul (50ng);② 10 x激酶缓冲液:2g1;③ [y-......阅读全文
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）可以：（1）研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用；（2）可用于DNA定性和定量分析；（3）用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。实验方法原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初
实验方法原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列
实验方法原理 一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的
1.探针的标记： (1) 如下设置探针标记的反应体系： 待标记探针 (1.75pmol/微升) 2微升 T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X) 1微升 Nuclease-Free Water 5微升 [γ-32P]
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白
探针冷竞争反应：Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液（5X） 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 2微升未标记的探针 1微升标记好的探针 1微升总体积 10微升突变探针的冷竞争反应：Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shif
1.探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10X） 1微升Nuclease-Free Water 5微升[γ-32P]ATP（3,000Ci/mmol at 10mCi/ml）
Andrea J. Gossett and Jason D. Lieb1Department of Biology, University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, NC 27599, USA1Correspon
同无标记技术相比，利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低，例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验，无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而，基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性，像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中，研究人员该如何选择合适的检测技术呢？不要着急，下
实验概要凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前
凝胶迁移滞后实验（electrophoretic mobility shift assays，EMSA）是近年发展起来的研究核酸与蛋白质相互作用简单、快速、敏感的方法。目前已经成为转录因子研究的经典方法。其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合，电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的
国立首尔大学化学系CRI化学蛋白组学Wan Gi Byun团队在《Chembiochem》发表了他们最新的研究成果，基于荧光的紧密结合分析发现了一种蛋白质-RNA相互作用的小分子调节剂。 那为什么要研究RNA-蛋白之间的相互作用呢？ RNA和蛋白是可以相互作用的生物分子，可以通过物理
转录因子(transcription factor，TF)在真核生物的基因表达过程中发挥着重要作用，或调节基因表达的强度，或控制目的基因的时空特异性表达，或应答外界刺激和环境胁迫。近年来，随着干细胞研究的不断升温，人们对转录因子的兴趣也日益浓厚。同一个基因组，为何最终分化成不
通过Sapphire平台研究基于荧光的一种蛋白质-RNA相互作用的小分子调节剂Azure Biosystems国立首尔大学化学系CRI化学蛋白组学Wan Gi Byun团队在《Chembiochem》发表了他们最新的研究成果，基于荧光的紧密结合分析发现了一种蛋白质-RNA相互作用的小分子调节剂。那为
2018年12月17日，Nature Cell Biology 发表了一篇撤稿声明，来自西班牙奥维耶多大学（Universidad de Oviedo）的研究者 Carlos López-Otín 等人撤回了他们于2015年7月27日发表在该刊物上的文章 “NF-κB activation im
实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，
Or gel mobility shift assay, gel shift assay, gel retardation, electrophoretic mobility shift assay (EMSA) EMSA Using Oligos (Mike A. Dyer)A
ArrayStarTM转录因子活性ELISA试剂盒可以快速、灵敏地检测细胞核提取物中转录因子的DNA结合活性。试剂盒采用96微孔板，标记探针是生物素标记的双链寡核甘酸片段，含有转录因子的特异性DNA结合序列。当标记探针与细胞核抽提物一起孵育时，核抽提物中活性形式的转录因子与探针特异性结合，形成转录因
环状RNA作为研究持续火热的明星分子，不同于对其丰富的表达谱研究，环状RNA功能机制研究还仅仅处在起步阶段。环状RNA研究多为miRNA海绵机制，部分circRNA可竞争性结合miRNA，解除miRNA对靶基因的抑制作用，上调靶基因的表达。其实，环状RNA可以通过结合不同种类的功能蛋白，分别在转
环状RNA作为研究持续火热的明星分子，不同于对其丰富的表达谱研究，环状RNA功能机制研究还仅仅处在起步阶段。环状RNA研究多为miRNA海绵机制，部分circRNA可竞争性结合miRNA，解除miRNA对靶基因的抑制作用，上调靶基因的表达。其实，环状RNA可以通过结合不同种类的功能蛋白，分别在转
常见变异性免疫缺陷病(CVID)是指无明显诱因的低丙球蛋白血症。在大多数病例中的遗传原因尚不明确，只有少于10%的患者有家庭疾病史。大多数病人有正常数量的B细胞，但是缺乏浆细胞。 我们使用全外显子基因测序和基于阵列的比较基因组杂交技术评估CVID病人和低B细胞数病人的分型。使用凝胶电泳迁移实验
最近电视剧《三十而已》热播，里面顾佳的角色很受大家喜欢，她上得厅堂，下得厨房，能屈能伸，不卑不亢，有学识，有魄力，面对威胁很从容，打完架依然可以妆容精致、不慌不忙地戴上手表穿上高跟鞋，有条不紊，这女人太酷，小编也忍不住安利一下。但是这么完美的一个人，背后付出的努力可想而知，三十而已，她对待人生、
实验步骤生物素标记探针:1. 按如下顺序加入反应物，温和混匀，切勿涡漩 超纯水 &nb
γ丁内脂（γ-butyrolactone简称GBL）生物合成基因afsA和GBL受体基因arpA的两对同系物位于吸水链霉菌基因组的不同位置。井冈霉素是一种重要的抗菌抗生素，同时也是抗糖尿病药物合成的关键底物。抑制afsA能够使急剧降低井冈霉素的生物合成，删除arp同系物能够分别增加井冈霉素的产率
环状RNA作为研究持续火热的明星分子，不同于对其丰富的表达谱研究，环状RNA功能机制研究还仅仅处在起步阶段。环状RNA研究多为miRNA海绵机制，部分circRNA可竞争性结合miRNA，解除miRNA对靶基因的抑制作用，上调靶基因的表达。其实，环状RNA可以通过结合不同种类的功能蛋白，分别在转
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针
公司简介 武汉赛默飞生命科技有限公司成立于2019年，注册资金100万元，公司光谷生物产业园。赛默飞生命科技致力于为行业内的客户提供技术开发、技术咨询、技术转让等服务，秉承着“我们用心 客户省心”的服务理念打造出一支敢于创新、敢于挑战的综合服务团队。 赛默飞生命科技主营业务：小鼠主要
每一个领域的发展都是基于技术的进步和革新，蛋白质组学亦然。蛋白质的可变性和多样性等特殊性质导致了蛋白质研究技术远远比核酸技术要复杂和困难得多，但正是这些特性参与和影响着整个生命过程。在开始实验之前，先看看这篇技术简介吧。一 蛋白质与DNA相互作用在许多的细胞生命活动中，例如DNA复制、mR
公司简介 武汉赛默飞生命科技有限公司成立于2019年，注册资金100万元，公司光谷生物产业园。赛默飞生命科技致力于为行业内的客户提供技术开发、技术咨询、技术转让等服务，秉承着“我们用心 客户省心”的服务理念打造出一支敢于创新、敢于挑战的综合服务团队。 赛默飞生命科技主营业务：大鼠热休
通过串联删除吸水链霉菌5008的γ丁内脂受体基因提高井冈霉素产量2. afsA及arpA同系物参与井冈霉素生物合成分别删除afsA以及arpA同系物。shbA1失活导致井冈霉素产量下降超过90%；ShbA2和shbA3失活分别导致产量下降77%和61%（Fig 3A）。ΔshbR1和Δshb