DNA定量
Characterization of dnaLEVEL IMaterialsDNA sampleSSC bufferUV spectrophotometer 3 and quartz cuvettesProcedureDissolve a small quantity of your extracted DNA in 3.0 ml of 0.1X SSC.Turn on and blank a UV spectrophotometer at 220 nm (use 0.1X SSC as the blank). Determine the absorbance of your sample DNA at 230 nm.Change the wavelength to 230 nm, reblank the spectrophotometer and measure the absorbance of the......阅读全文
DNA定量
Characterization of dnaLEVEL IMaterialsDNA sampleSSC bufferUV spectrophotometer 3 and quartz cuvettesProcedureDissolve a small quantity of your extrac
DNA的定量
一、 实验原理核酸分子（DNA或RNA）由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键，在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰，其吸收强度与核酸的浓度成正比，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml，ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以
DNA的定量（二）
2. EB荧光分析法（1）琼脂糖凝胶的制备。（2）样品的准备。把待测DNA样品进行1：2连续稀释，并准备一份DNA标准液作对照。（3）上样。稀释样品与上样缓冲液按1：5混合均匀后上样。（4）电泳。用100V稳压电泳至溴酚蓝指示剂迁移到凝胶的3/4处停止电泳。（5）取出凝胶，入EB荧光染液中作用20m
几种DNA定量方法
Quantitation of DNAFluorescent quantitationWear gloves and goggles protecting from EtBr and UV lightWith an EDP (dilute mode) pick up 9 µl TE and 1 µl
TCA沉淀法定量DNA
1. Dilute radioactive sample to a 100 ml volume2. Spot 5 ml of the sample onto the center of a 2.4 cm Whatman GF/C glass-fiber disc.3. Mix 5 ml of the
DNA的纯化浓缩与定量
实验目的 将复杂的细胞分子混合物加入有机溶媒萃取以除去蛋白质及其它成分，就可以纯化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白质变性(denaturaion)的特性来进行萃取的步骤，DNA和RNA不溶于有机溶媒中，而溶于水层。另外，分子选殖(molecular clon
分级定量PCR检测血清HBV－DNA
引言 PCR技术对基因从定性到定量的测定是分子生物学方法研究一大飞跃，定量PCR已成为目前分子生物学技术研究的热点之一. 迄今研究和应用的定量PCR方法有4种，即PCR产物的直接定量；极限稀释法；靶基因与参照基因的同步扩增；竞争性PCR法. 以上方法各有利弊，选择某一方法取决于靶基因的特性，对准确度
真核细胞DNA的制备与定量
制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常
DNA和RNA定量利器：Qubit－4
新一代测序（NGS）实验中，我们需要将精确量的DNA文库分子上样到测序仪中。如果测序运行时的文库分子过多或过少，都会使数据质量受损。这不仅浪费宝贵的样本和试剂，也浪费我们和仪器的时间。对于芯片分析（Microarray）和实时定量PCR（qPCR）而言，精确测定样本中的DNA或RNA也是必需的。以往
DNA的定量实验原理和步骤
一、 实验原理核酸分子（DNA或RNA）由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键，在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰，其吸收强度与核酸的浓度成正比，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml，ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以
HBV－DNA定量检测有何意义？
目前检查乙肝病人最常用的方法是乙肝病毒抗原和抗体的测定。但此项检查的是乙肝病毒的抗原和人体对这些抗原的免疫反应，并不能代表病毒本身，无法知道体内病毒的多少。另一方法是聚合酶链反应，又称PCR法，多年的临床实验证明，常规PCR法假阳性、假阴性率较高，重复性差，且不能定量。近年，新研制成功的荧光定
分级定量PCR检测血清HBVDNA
PCR技术对基因从定性到定量的测定是分子生物学方法研究一大飞跃，定量PCR已成为目前分子生物学技术研究的热点之一. 迄今研究和应用的定量PCR方法有4种，即PCR产物的直接定量；极限稀释法；靶基因与参照基因的同步扩增；竞争性PCR法. 以上方法各有利弊，选择某一方法取决于靶基因的特性，对准确度的要
关于HBVDNA定量检测结果分析
1、如果HBV-DNA定量检测结果小于1.0e3cps/ml，体内乙肝病毒数量极少，一般的实验室检测不出来。如果乙肝患者的肝功能正常、没有肝炎症状或者体征，可以暂时不用治疗，但需要定期检查肝功能、HBV-DNA等，发现病变及时治疗。 2、如果HBV-DNA定量检查结果大于1.0e3cps/ml
HBVDNA定量检测阳性的治疗方法
HBV-DNA定量检测阳性说明体内存在病毒复制且传染性相对强。这种情况下，不论是乙肝大三阳还是乙肝小三阳患者，此时都需要进行抗病毒治疗。若乙肝患者肝功能正常，此时建议患者做肝穿刺检查，结果提示肝脏有炎症时也要进行抗病毒治疗，尤其是有肝癌家族史的患者，无论肝脏出现炎症，都需要进行治疗。 乙肝患者
乙型肝炎病毒DNA荧光PCR定量检测
Ct值是荧光定量PCR的一个指标，代表达到设定阈值所需要的循环数。一般Ct值越小定量值越高。通俗地将，这个检测结果的意义是：通过荧光定量PCR的方法检测血液中乙肝病毒DNA的量。仪器测得Ct值为18.20,根据Ct值与定量DNA之间的换算公式，计算出每毫升血中含有82450000（八千多万）个乙肝病
荧光定量PCR检测HPVDNA相关介绍
（一）荧光PCR HPV DNA检测 HPV感染是子宫颈癌及其癌前病变（子宫颈上皮内瘤样变）的主要病因。因此，可以将检测HPV感染作为子宫颈癌的一种筛查手段。HPV-DNA检测发现高度病变的敏感度为97.7%~100%，平均为98.6%，比细胞学检查高二十多个百分点。 如果将两者结合进行检查，敏感
荧光定量pcr仪是怎样测试dna，rna的
荧光定量pcr仪是怎样测试dna，rna的普通的基因扩增仪（PCR仪）只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果，还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病，品种分子标记筛选，甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是，某些需要定量的实验就必须用
植物DNA的提取与定量分析实验
实验方法原理幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段，细胞核较大而细胞质较少，核酸浓度高，且内含物少，次生代谢产物少，蛋白质及多糖类物质相对较少，在SDS或CTAB物质存在时，经机械研磨，使细胞破裂释放出内含物，提取的DNA、RNA的产量高，纯度好。提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活D
植物DNA的提取与定量分析实验
实验方法原理幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段，细胞核较大而细胞质较少，核酸浓度高，且内含物少，次生代谢产物少，蛋白质及多糖类物质相对较少，在SDS或CTAB物质存在时，经机械研磨，使细胞破裂释放出内含物，提取的DNA、RNA的产量高，纯度好。提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活D
植物DNA的提取与定量分析实验
实验方法原理 幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段，细胞核较大而细胞质较少，核酸浓度高，且内含物少，次生代谢产物少，蛋白质及多糖类物质相对较少，在SDS或CTAB物质存在时，经机械研磨，使细胞破裂释放出内含物，提取的DNA、RNA的产量高，纯度好。提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活
数字PCR技术在DNA定量精准等领域的应用
数字PCR先进的数字PCR技术实现了样品中的单分子核酸扩增，从而使的DNA定量的精准度提高到了全新水平。Philip与Stilla Technologies的首席执行官兼联合创始人Rémi Dangla进行了交流，讨论了数字PCR技术领域的进展和挑战。Stilla Technologies公司总部位
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
基本方案 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
PCR被用于从每样品的1〜20 000个分子中定量某一特定DNA序列的 数量。此外，它可辅助评估那些造成这类实验失败的污染序列的存在。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版实验材料DNA试剂、试剂盒蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl
两种－DNA定量方法的比较：光吸收和荧光
对微量的双链 DNA 进行定量在各种生物学应用中都显得非常重要，包括标准的分子生物学技术中的应用，例如 cDNA 文库的建立；用于亚克隆的 DNA 片段的纯化；诊断技术中的应用，例如定量 DNA 扩增产物，在药物研究中测定 DNA 分子。最常用的检测核酸浓度的方法就是检测核酸在 260nm （ A2
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl 10 mmol L EDTA pH 7.4 缓冲的酚（储于室温）24 ：1（V V)氯仿 异戊醇10 mol L乙酸按冰冷的100%乙醇70%乙醇TE缓冲液pH
实时荧光定量PCR可以用来精确测定DNA浓度吗
实时荧光定量PCR可以用来精确测定DNA浓度吗实时荧光定量PCR不是用来测浓度的，可以用来做基因的拷贝数。但是如果你的产物单一，有相应的标准品，也是可以测浓度的，浓度的准确性和你的标准曲线相关。实时荧光定量PCR：实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitati
定量分析晚期细胞凋亡中DNA片段的直接方法
多细胞生物是由高度组织化的细胞群落组成的，为了这个细胞群落的茁壮成长，重要的是1.通过复杂的细胞过程，如细胞增殖和凋亡，2.建立稳态。这两个过程中任何一个过程的不适当转变都会导致疾病。例如，神经元凋亡活性的增加是各种神经退行性疾病如阿尔茨海默氏症和帕金森氏症的根源。相反，凋亡机制的丧失会导致细胞过度
Azure－Cielo™实时荧光定量PCR系统在检测单拷贝DNA的应用
介绍：Azure Cielo™ 3和Cielo™ 6 实时荧光定量PCR系统具有卓越的灵敏度。该系统配置新型的高性能光学系统，采用16组光纤单孔扫描设计，一根光纤用于高能LED激发，另一根用于光信号检测，可16孔同时采集(图1)。特殊的激发/发射方式保证单孔扫描时仅激发一个孔，光纤传导也有效消除
qPCR－和－Crystal－dPCR－进行复杂生物样本DNA/RNA绝对定量的比较
复杂生物样本（含PCR抑制剂）中DNA/RNA绝对定量的解决方案： Crystal dPCR更耐受抑制剂dPCR和qPCR(Real-time PCR)技术定量检测DNA/RNA时抑制剂的影响对比众所周知，数以千种的化学物质会抑制PCR反应有作用，而生物样本往往都会含有类似的化合物，在DNA/RNA
基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展（一）
摘要 数字PCR是一项针对单分子目标DNA的绝对定量技术。该技术是将含有DNA模板的反应溶液分配到大量独立的反应室中并且发生扩增反应，通过统计反应室中的阳性信号来定量DNA的拷贝数。DNA样品在反应室中随机和独立分布是单分子成功扩增和准确定量D NA拷贝数的关键因素。本文综述了数字PCR的发展历