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分级定量PCR检测血清HBVDNA

引言 PCR技术对基因从定性到定量的测定是分子生物学方法研究一大飞跃,定量PCR已成为目前分子生物学技术研究的热点之一. 迄今研究和应用的定量PCR方法有4种,即PCR产物的直接定量;极限稀释法;靶基因与参照基因的同步扩增;竞争性PCR法. 以上方法各有利弊,选择某一方法取决于靶基因的特性,对准确度的要求,需要相对还是绝对的定量. 其中竞争性PCR方法的定量比较准确,被较多地采用[1]. 但该方法在实际应用时,需将恒量的样品DNA与一系列稀释的各种浓度的竞争性模板混合后进行PCR扩增,zui后进行电泳,找出待测模板与竞争性模板终产物有相等摩尔数的一个反应,从而确定待测模板的初始量. 因此,对一个样品定量时需要进行多个反应,不适应多样品的同时定量测定. 我们建立了分级定量方法,只用3种浓度的竞争模板与恒定量样品DNA进行3个PCR反应,通过测定待测模板与竞争模板的终产物荧光强度比值,来确定待测样品DNA的初始模板量. 该方法适合多......阅读全文

分级定量PCR检测血清HBV-DNA

 PCR技术对基因从定性到定量的测定是分子生物学方法研究一大飞跃,定量PCR已成为目前分子生物学技术研究的热点之一. 迄今研究和应用的定量PCR方法有4种,即PCR产物的直接定量;极限稀释法;靶基因与参照基因的同步扩增;竞争性PCR法. 以上方法各有利弊,选择某一方法取决于靶基因的特性,对

乙型肝炎病毒DNA定量检测临床应用的若干问题与思考

HBV DNA 检测技术目前已经在临床中普遍应用。但在实际工作中,不少临床医师对如何认识、评价和使用 HBV DNA 检测结果仍存在着一些困惑,甚至可能因认识不足、应用不当导致了错误的诊断和治疗。现就 HBV DNA 定量检测临床应用的基因诊断和临床治疗研究阐述如下。一、如何正确认识和评价 HBV

什么是PCR阴性?

举乙肝的例子来说:通过酶免的方法查乙肝两对半和通过荧光定量PCR的方法学查乙肝DNA小明得了肝炎,但他不知道自己得了肝炎,有一天身体不舒服或者正常体检(比如入职体检),他去看医生,临床医生怀疑他得了肝炎(肝炎有很多种比如病毒性肝炎,也就是病毒倾入他体内后由于人体的三道防线没能把病毒消灭掉,导致病毒在

实时荧光定量PCR技术在分子生物学和医学研究等领域的...

  定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推出,它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用对荧光信号积累的实时检测来监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该

乙型肝炎的实验室诊断及质量控制

2005年12月我国第一部《慢性乙型肝炎防治指南》颁布,2006年1月卫生部颁布了《2006-2010年全国乙型病毒性肝炎防治规划》。其目的在于科学、规范和有效开展我国乙型肝炎防治工作。卫生部计划在未来3~4年内逐步建立全国乙型肝炎实验室检测网络,制定《全国乙型肝炎实验室检测工作技术规范》,加强实验

同比增长600% 达安基因公布2020年Q1财报

生殖健康与优生优育系列*人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 核酸测定试剂盒 (PCR-荧光探针法)    48反应/盒*人乳头瘤病毒 (6,11型) 核酸检测试剂盒 (PCR-荧光法)    20人份/盒*单纯疱疹病毒

谈分离胶对血清中HBV DNA测定结果的影响

当前分析分离胶促凝剂真空负压采血管不仅填充有进口分离胶,而且在采血管内壁上均匀涂布有促凝剂,因此可大大缩短血液凝固时间。进口分离胶对血清中的蛋白的吸附能力低,稳定性强,离心后的分离胶固化形成屏障,平整地将血清与血细胞完全分离,能够有效阻止血清和血细胞间的物质交换,从而有利于获得高质量的血清,使血液检

荧光定量PCR应用——病毒篇

诺如病毒诺如病毒(Norovirus,NVs)属于杯状病毒科诺如病毒属,是引起非细菌性急性胃肠炎的主要病原体,世界50%以上的胃肠炎暴发均由它引起,可在医院、学校、餐馆等人群密集地爆发急性胃肠炎。根据病毒RNA 聚合酶和衣壳蛋白核苷酸序列的差异,诺如病毒分为5个基因型,其中GI、GII 型诺如病

肝炎病毒标志物的检验,你知道多少?

肝炎病毒学标志物检查:是用来判断是否感染肝炎病毒,常见嗜肝病毒学标志物包括甲肝抗体、乙肝两对半、乙肝病毒DNA,丙肝抗体、丙肝病毒RNA,丁肝抗体,戊肝病毒抗体。各类病毒型肝炎传播途径(不是所有类型肝炎均通过吃饭传播):甲型、戊型病毒型肝炎主要通过消化道传播;乙型病毒型肝炎主要通过输血、性接触、母婴

乙型肝炎病毒感染标志物的检测现状和思考

 全球慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者约4亿,亚太地区是全球HBV的高发区[1]。在我国临床各类(约103种)肝病中,病毒性肝病占一半以上;病毒性肝病中,乙型肝炎占80%以上。一般人群HBsAg携带率为7.18%。据此推算,我国现有的慢性HBV感染者约9 300万例,其中慢性乙型肝炎患者约

肝炎病毒标志物的检验,你知道多少?

  各类病毒型肝炎传播途径(不是所有类型肝炎均通过吃饭传播):甲型、戊型病毒型肝炎主要通过消化道传播;乙型病毒型肝炎主要通过输血、性接触、母婴传播;丙型病毒型肝炎主要通过输血、性接触、纹身、吸毒注射器、母婴传播;丁肝主要是血液传播。  肝炎病毒标志物知多少?  甲型肝炎  甲型肝炎:(HAV-IgM

感染性疾病基因诊断进展

感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、细菌、衣原体、支原体和螺旋体等。这些病原体的传统检测方法通常采用形态学检查,体外培养和免疫学试验。但对某些难以培养的病原体,抗原抗体检测不能判断体内病原体 DNA 或 RNAde 复制情况,或存在检测灵敏度低等问题。自聚合酶链反应( PCR )

十九大!看看分子病理领域,未来发展方向!

  今天党的十九大召开,习近平大大指出:中国特色社会主义进入新时代,我国社会主要矛盾已经转化为人民日益增长的美好生活需要和不平衡不充分的发展之间的矛盾。想想都觉得高中政治课本过时了,而考研又多了一道大题。然而这些年,医疗领域进展可不止一点!就让我们一起看看这些年,分子病理领域的发展!  其实相对于其

“大三阳”“小三阳”是怎么来的?(内附乙肝五项解析)

乙型肝炎病毒是一种DNA病毒,属于嗜肝DNA病毒科,该科病毒以RNA中间体为模板经反转录合成DNA链。在电镜下观察,HBV感染者血清中存在三种形式的颗粒:Dane颗粒、小球形颗粒、丝状或核状颗粒。一般情况下,血清中小球形颗粒最多而Dane颗粒最少。常用检测方法:在我国有50%~70%的人受过感染,由

HBV变异对乙肝病毒检测的影响

 [摘 要] 目的:了解无锡地区HBV前C/C基因变异情况,探讨基因变异对乙肝病毒标志物(HBVM)及HBV DNA定量的影响。方法: HBVM用时间分辨荧光定量试剂检测;HBV DNA定量PCR以德国Roche Lightcycler 荧光定量扩增仪检测;HBV DNA前C/C测序使用①

乙肝病毒携带产妇血清和乳汁HBV DNA的相关性探讨

作者:江冬梅 朱海滨    作者单位:272000山东济宁市传染病医院分子生物学实验室【摘要】 目的:探讨产妇血清和乳汁HBV-DNA的相关性,以指导母乳喂养。方法:选取2003年3月~2008年6月在门诊或住院的乙型病毒性肝炎病毒携带产妇115例,

乙肝检测项目结果解析大全

生物化学检查血清ALT与AST血清ALT(丙氨酸氨基转移酶)和AST(门冬氨酸氨基转移酶)水平一般可反映肝细胞损伤程度,最为常用。若大于正常上界10 倍见于急性病毒性肝炎、中毒性(药物性)肝坏死和缺血性肝炎。但转氨酶水平的高低不能完全代表肝功能的好坏, 更确切地说转氨酶水平与肝功状态不成平行关系。A

PCR检测输血传播病毒DNA的临床应用

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎、急性重型肝炎及肝硬化病例中,有部分病例无法用已建立的甲、乙、丙、丁、戊型肝炎的实验室诊断方法进行病原学分型。继1995年发现庚型肝炎病毒(HGV)后,1997年日本学者Nishizawa等[1]报道了应用代表性分析法发现了一种可能与输血后肝炎相关的病毒,暂时称为输血传

ELISA法与PCR法检测乙型肝炎病毒标志物的实验研究

[摘  要] 目的:探讨ELISA法和PCR法联合检测对乙型肝炎诊断的临床价值。方法:采用ELISA法与PCR法同时检测421份血清标本。结果:用ELISA法测定HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)时,HBVDNA阳性率高达90.6%;用ELISA法测定HBsAg(+)、抗H

血清HBV标志物、前S1抗原与HBVDNA检测结果的相关性

【摘要】  目的  探讨HBV血清标志物前S1抗原(HBVPreS1-Ag)与HBVDNA的相关性。方法  用ELISA法对乙肝患者分别进行五项HBV血清标志物,前S1抗原检测,同时采用PCR法检测HBVDNA的含量。结果 &nb

乙肝病毒血清标记物与血清HBV-DNA的关系

【摘要】  目的: 探讨不同乙肝感染模式的患者与HBV-DNA定量结果进行对比分析。方法: 采用ELISA方法检测乙肝病毒血清标记物, 荧光定量PCR (FQPCR) 检测HBV-DNA, 比较二者之间的关系。结果: HBsAg、 HBeAg、 HBcAb阳性组和HBsAg、 HBeAg

荧光定量PCR:简介,原理,应用

荧光定量PCR简介 荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据

荧光定量PCR:简介、原理、应用

荧光定量PCR的应用分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理

带您了解肝炎的病原学检测

作者:周宗   审核:吴洪巧2016年7月28日是第六个世界肝炎日,7月28日是已故诺贝尔奖得主巴鲁克·布隆伯格的诞辰日,为纪念这位乙肝病毒发现者,世界卫生组织将每年的世界肝炎日变更为7月28日。肝炎一直是全球性重要公共卫生问题之一。世卫组织最新数据显示,世界上有4亿人感染乙型和丙型肝炎,

乙肝病毒血清标记物与血清HBV-DNA的关系(2)

  3  讨论      HBV血清学标志物检测是乙型肝炎病原学诊断的指标,  包括HBsAg、 HBsAb、 HBeAg、 HBeAb和HBcAb五项指标。HBsAg阳性表示存在HBV感染,  见于急性肝炎、 慢性肝炎或无症状携

第三届中国食品与农产品安全检测国际论坛大会报告(一)

  2014年5月7-8日,第三届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会在北京国际会议中心盛大召开。本届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会由中国仪器仪表学会分析仪器分会、中国仪器仪表行业协会分析仪器分会和中国仪器仪表学会检验检

【细分IVD】生化、免疫、血球、分子和POCT

  IVD行业具体可分成五个子版块:生化诊断,免疫诊断,血球检测,分子诊断,以及POCT。  1.生化诊断  主题词:开放走向封闭  1.1 定义及分类  生化产品由生化仪、生化试剂、校准品共同组成检测系统来使用,一般是放置在医院检验科、体检中心做常规生化检查。系统分类系统名称说明备注封闭系统AAA

血清HBsAg 定量检测及探讨-从检验者角度看HBsAg定量

赵秀英首都医科大学附属北京佑安医院临床检验中心(北京,100069) [摘要] 随着乙肝病毒表面抗原(HBsAg)检测技术的突破,以血清HBsAg 定量作为慢性乙肝抗病毒疗效观察及治疗终点预测逐渐得到国际认可。研究表明血清HBsAg 定量:1) 分别与HBV DNA定量及肝内cc

时荧光定量PCR试剂盒应用领域

优博生物技术有限公司技术人员在大量的实验基础上,对SYBR实时荧光定量PCR技术进行了大量实验和对比分析,公司所开发的SYBR实时荧光定量PCR试剂盒误差小、稳定性强,可以广泛应用于核酸定量分析、基因表达差异分析 、SNP检测 、甲基化检测、医学研究等众多领域,解决科研和生产领域中技术难题。 1

液相芯片技术的原理与应用

液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原抗体、酶底物、配体