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藻类多糖的结构与生物活性研究实验_高效液相层析法

实验材料大型藻类试剂、试剂盒NaNO;Na2HPO4•12H2O;EDTA仪器、耗材偏光光度计;高效液相色谱仪实验步骤(1)多糖的纯化是将离心分离出的1000 ml培养液,用40℃真空浓缩到50 ml,再移入到透析袋内于4 ℃蒸馏水中透析三天。早晚更换一次蒸馏水,将透析袋内液体倒入烧杯,边搅拌边加入4倍体积99%乙醇,4 ℃过夜。11000 r/min离心得到沉淀,冷冻干燥获得粗多糖。经DEAE-sephacel柱层析,0~2 mol/L氯化钠梯度洗脱进一步纯化,纯度以醋酸纤维薄膜电泳法[1]鉴定。 (2)分子量的测定是使用TSK-GEL.G300SWXL(7.8 mm×300 mm柱)GPC的高效液相层析(HPLC)法。移动相为1%三己基胺,检测使用示差屈折计(YRU-880RI-UI检测器),同样条件下以Pulluna-ShodexSTANDARDP-82(分子量分别为5.9,11.8,22.8,47.8......阅读全文

藻类多糖的结构与生物活性研究实验_高效液相层析法

实验材料大型藻类试剂、试剂盒NaNO;Na2HPO4•12H2O;EDTA仪器、耗材偏光光度计;高效液相色谱仪实验步骤(1)多糖的纯化是将离心分离出的1000 ml培养液,用40℃真空浓缩到50 ml,再移入到透析袋内于4 ℃蒸馏水中透析三天。早晚更换一次蒸馏水,将透析袋内液体倒入烧杯,边搅拌边加入

藻类多糖的结构与生物活性研究实验

高效液相层析(HPLC)法             实验材料 大型藻类

高效液相层析法

高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋白质

高效液相层析法简介

高效液相层析(HPLC)在经典液相层析法基础上,引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点,对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等尤其有利,根据流动相和固定相相对极性,高效液相色谱分析可分为正相和反相两种。

高效液相层析法的主要类型

⑴ 液-固吸附层析:固定相是具有吸附活性的吸附剂,常用的有硅胶、氧化铝、高分子有机酸或聚酰胺凝胶等。液-固吸附层析中的流动相依其所起的作用不同,分为 “底剂”和洗脱剂两类,底剂起决定基本色谱的分离作用,洗脱剂起调节试样组份的滞留时间长短,并对试样中某几个组份具有选择性作用。流动相中底剂与洗脱剂成分的

反相高效液相层析实验

多肽和蛋白质的分离             实验材料 蛋白质

反相高效液相层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1.  用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂,梯度从100%有机溶剂到100%水,流速1 ml/min,持续15 min 以上。 2.  以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子

高效液相层析法-生化检验

高效液相层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。高效液相层析(HPLC)在经典液相层析法基础上,引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点,对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和

分子排阻高效液相层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SE缓冲液仪器、耗材 层析柱实验步骤 1.  用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2.  注射100 μl  缓冲液进

分子排阻高效液相层析实验

实验材料蛋白质试剂、试剂盒SE缓冲液仪器、耗材层析柱实验步骤1.  用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2.  注射100 μl  缓冲液进行一次空白样