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酶的载体的固定化方法

酶的固定化方法不下百种,归纳起来大致可以分为三类,即载体结合法、交联法和包埋法。 (一)载体结合法载体结合法是指将酶固定到非水溶性载体上的方法。根据固定方式的不同,这种方法又可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法。物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性炭和多孔玻璃等。离子结合法是指通过离子键将酶结合到具有离子交换基团的非水溶性载体上的方法,载体有离子交换树脂等。共价结合法是指酶和载体以共价键的形式结合在一起的方法,这种方法需要酶和载体都具有氨基、羧基或羟基等官能团。 (二)交联法交联法是指通过双功能试剂,将酶和酶联结成网状结构的方法。交联法使用的交联剂是戊二醛等水溶性化合物。 (三)包埋法包埋法是指将酶包裹在多孔的载体中。例如,将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中。前者包埋成格子型,后者包埋成微胶囊型。 与固定化酶技术相......阅读全文

酶免疫技术中酶和酶作用底物

酶和酶作用底物(一)酶的要求: 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检

人碳酸酐酶(CA)酶酶联免疫分析

人碳酸酐酶(CA)酶酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中碳酸酐酶(CA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人碳酸酐酶(CA)水平。用纯化的人碳酸酐酶(CA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往

诊断酶学:淀粉酶

淀粉酶(amylase)一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶。分类根据作用的方式可分为α-淀粉酶(EC3.2.1.1.)与β-淀粉酶(EC3.2.1.2.)。(1)α-淀粉酶广泛分布于动物(唾液、胰脏等)、植物(麦芽、山萮菜)及微生物。微生物的酶几乎都

酶免疫技术酶与底物

酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染

什么叫单体酶,寡聚酶,多酶复合体

全酶,由蛋白质组分和非蛋白质组分组成的结合酶。辅酶,是酶的辅因子的有机分子,本身无催化作用。辅基,酶的辅因子中的较小的非蛋白质部分。

固定化酶固定化酶与游离酶相比的优点

固定化酶与游离酶相比的优点:①极易将固定化酶与底物、产物分开;②可以在较长时间内进行反复分批反应和装柱连续反应;③在大多数情况下,能够提高酶的稳定性;④酶反应过程能够加以严格控制;⑤产物溶液中没有酶的残留,简化了提纯工艺;⑥较游离酶更适合于多酶反应;⑦可以增加产物的收率,提高产物的质量;⑧酶的使用效

血浆特异酶都包括什么酶?

血浆特异酶主要是指在血浆中发挥作用的酶。有少部分酶在细胞合成后分泌到血液中行使其功能,这一类酶具有代表性的就是和凝血过程有关的一系列凝血因子及有关的纤溶因子。它们以酶原状态分泌入血,在一定的条件下被激活,引起相应的生理或病理变化。它们大多数在肝内合成,在血浆中的浓度甚至超过器官细胞内浓度。有的可以作

酶的分类和酶的命名

   一、酶的分类  国际酶学委员会(I.E.C)规定,按酶促反应的性质,可把酶分成六大类:  1.氧化还原酶类(oxidoreductases)指催化底物进行氧化还原反应的酶类。例如,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等。  2.转移酶类(transferases)指催化底物之间

双酶切反应酶活性分析

同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲

重组酶聚合酶扩增叙述

  重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37℃左右。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链D