酶免疫技术中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物（一）酶的要求： 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合：1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。4.易与抗体或抗原偶联 ，标记后酶活性保持稳定，且不影响 标记抗原与抗体的免疫反应性 。5.酶、辅助因子及其底物对人体无害 ，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物应价廉易得。（二）常用的酶1.辣根过氧化物酶（HRP）：目前酶联免疫吸附试验中应用最广泛 的标记用酶。由无色的糖蛋白(主酶)和亚铁血红蛋白(辅基)结合而成的复合物。辅基是酶活性基团 ，而主酶则与酶活性无关 ，HRP的纯度用RZ(HRP分别在40......阅读全文
酶免疫技术中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物（一）酶的要求： 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合：1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检
酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢？
酶和酶作用底物 （一）酶的要求： 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合： 1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。 2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。 3.作用专一性强 ，酶活性不受样品
酶免疫技术酶与底物
酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染
免疫酶技术中常用的酶-底物系统
各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性
酶免疫技术常用的底物知识点小结
1.HRP的底物 作为供氢体的底物化合物较多，常用的有以下几种： （1）邻苯二胺（OPD）：OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。0PD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物，但其应用液稳定性差，易
酶免疫技术常用的底物知识点小结
1.HRP的底物 作为供氢体的底物化合物较多，常用的有以下几种： （1）邻苯二胺（OPD）：OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。0PD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物，但其应用液稳定性差，易
酶免疫技术常用的底物知识点小结
1.HRP的底物 作为供氢体的底物化合物较多，常用的有以下几种：（1）邻苯二胺（OPD）：OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。0PD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物，但其应用液稳定性差，易变色，需新
用于酶联免疫测定（ELISA）酶的色原底物
辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2，2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2，2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6)，ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林：苯酚耦联底
异相酶免疫试验和均相酶免疫试验
Ag为待测抗原，AgAb-E为结合标记物，Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失，即结合标记物(AgAb-E)无酶活性，游离标记物(Ab-E)有酶活性； (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E
ELISA中的试剂（3）－酶的底物
3.3 酶的底物 3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应，最具代表性的过氧化物为H2O2，其反应式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2为供氧体，H2O2为受氢体。在ELISA中，DH2一般为无色化合物，经酶作用后成为有色的产物，以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二