关于活性氧分子荧光探针标记法的应用
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中产生的一系列活性氧簇(ReactiveOxygenSpecie),包括:O2·-、H2O2及HO2-·以及-OH等。目前研究发现ROS可双向调控某些肿瘤细胞的凋亡和增殖,并发现了自由基与细胞信号转导之间的内在关联。例如DNA损伤,以前的研究表明癌细胞要比正常的细胞积累着更多的ROS,而且癌细胞中水平增高的ROS一直被认为一件不好的事情,促进细胞中DNA损伤、遗传不稳定性和药物抗性。 目前细胞内ROS含量水平通常采用化学发光法、紫外-可见吸收分光光度法、荧光光度法、电子自旋探针以及选择性电极法等。目前较为普通的方式是荧光探针标记方法,检测是......阅读全文
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中产生
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用介绍
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用介绍
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中
细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,
检测酶活性的荧光探针
检测酶活性的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜除了具备荧光显微镜检测荧光酶细胞化学的作用以外,在检测活细胞酶活性动态变化方面有着无可比拟的优势。通过对细胞施予不同的处理因素可检测细胞内相应的酶被激活或灭活的动态变化过程。有的酶荧光探针是自身就可发出荧光、有的是与酶结合后发出荧光、有的则是被酶分解后发出荧
细胞膜流动性测定实验_荧光探针标记法
实验方法原理常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后,介质粘度增加,顺反异构受到抑制,成为唯一能发光的全反构型。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液DPH仪器、耗材荧光分光光度计离心机实验步骤1. 取对数生长期的肿瘤细胞,以pH
PCR扩增标记法探针标记
PCR扩增标记法探针标记 PCR扩增标记法的原理与普通的核酸PCR相同。即Taq DNA多聚酶以DNA为模板,在特异引物引导下,在PCR仪中合成cDNA探针。由于在反应体系中加入一定量的标记dNTP,因此扩增的同时又是一个标记过程。cDNA探针PCR扩增法标记原理
双链DNA探针标记法
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连
双链DNA探针标记法的介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到
分子杂交技术的核酸探针标记法
核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA